環(huán)狀RNA調(diào)控腫瘤免疫逃避
CircRNA是內(nèi)源性非編碼RNA，對(duì)核酸外切降解具有很強(qiáng)的抵抗力，保持較高的細(xì)胞穩(wěn)定性，與許多生理和病理過(guò)程相關(guān)，包括腫瘤發(fā)生，腫瘤的發(fā)展和免疫逃逸等。腫瘤免疫逃逸是腫瘤研究領(lǐng)域的重難點(diǎn)，circRNA能否參與調(diào)控腫瘤免疫逃逸這一過(guò)程，一起來(lái)看這篇文獻(xiàn)報(bào)道吧。
思維路線:
結(jié) 果:
1. 黑色素瘤中CD151衍生的circRNA分析
研究表明CD151在多種腫瘤中過(guò)表達(dá)并參與腫瘤進(jìn)展，檢測(cè)四對(duì)人類黑素瘤樣品CD151衍生的circRNA，發(fā)現(xiàn)circ_0020710表達(dá)顯著上調(diào)。circ_0020710是由CD151基因第1-9個(gè)外顯子組成長(zhǎng)度為1545 bp的環(huán)狀RNA。黑色素瘤樣品組織中circ_0020710表達(dá)上調(diào)，與臨床特征密切相關(guān)。
2. circ_0020710促進(jìn)黑色素瘤細(xì)胞增殖、遷移和侵襲
探索circ_0020710的生物學(xué)功能，黑色素瘤細(xì)胞中敲低circRNA活力被抑制，過(guò)表達(dá)可增強(qiáng)細(xì)胞活力，增加細(xì)胞遷移和侵襲。這些表明circ_0020710水平升高可促進(jìn)黑色素瘤進(jìn)展。
3. 黑色素瘤中circ_0020710充當(dāng)miR-370-3p海綿
circ_0020710可識(shí)別某些miRNA在黑色素瘤發(fā)展中發(fā)揮作用。四個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)（包括miRanda，circBank，TargetScan和RNAhybrid）用于預(yù)測(cè)circ_0020710的潛在miRNA，設(shè)計(jì)了ircRNA特異性探針在細(xì)胞中進(jìn)行circRIP分析，發(fā)現(xiàn)circ_0020710和miR-370-3p明顯富集，表明miR-370-3p是黑色素瘤細(xì)胞中與circ_0020710相關(guān)的關(guān)鍵miRNA之一。RIP分析表明circ_0020710可充當(dāng)miR370-3p的海綿，F(xiàn)ISH共定位、熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證miR-370-3p和circ_0020710之間的相互作用。
4. circ_0020710通過(guò)海綿miR-370-3p上調(diào)CXCL12表達(dá)
黑色素瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組分析127個(gè)上調(diào)差異表達(dá)基因（DEG）和45個(gè)下調(diào)的DEG，篩選出miR-370-3p靶向并上調(diào)的mRNA，包括CXCL12，KAT6A，C18orf25。熒光素酶報(bào)告基因及miR-370-3p過(guò)表達(dá)驗(yàn)證MiR-370-3p靶向調(diào)控CXCL12表達(dá)，上調(diào)circ_0020710細(xì)胞中CXCL12的表達(dá)增加，敲低circRNA后則表達(dá)減少。表明circ_0020710通過(guò)海綿miR-370-3p上調(diào)CXCL12表達(dá)。
5. 升高CXCL12促進(jìn)黑素瘤細(xì)胞增殖、遷移和侵襲
黑色素瘤中CXCL12水平顯著上調(diào)，miR-370-3p High組的CXCL12水平較低。細(xì)胞敲低CXCL12后，存活率抑制，遷移侵襲減少，CXCL12過(guò)表達(dá)促進(jìn)細(xì)胞增殖、遷移、侵襲。CXCL12過(guò)表達(dá)上調(diào)p-ERK，p-AKT和β-catenin水平，表明上調(diào)CXLC12激活多種途徑促進(jìn)腫瘤進(jìn)展。
6. 下調(diào)CXCL12逆轉(zhuǎn)circ_0020710誘導(dǎo)惡性表型
通過(guò)基因或藥理抑制circ_0020710過(guò)表達(dá)細(xì)胞中CXCL12，阻止circRNA過(guò)表達(dá)誘導(dǎo)的增殖、遷移和侵襲。降低circ_0020710過(guò)表達(dá)誘導(dǎo)的高p-ERK，p-AKT和β-catenin水平。這些結(jié)果表明CXCL12下調(diào)逆轉(zhuǎn)circ_0020710誘導(dǎo)的細(xì)胞惡性表型。
7. circ_0020710與細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞耗竭和抗PD-1治療耐藥性相關(guān)
CXCL12可募集抑制性免疫細(xì)胞，并最終導(dǎo)致細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞（CTL）耗盡。CXCL12和circ_0020710高表達(dá)樣本中CTL數(shù)量少。皮下異種移植腫瘤模型中circ_0020710高表達(dá)腫瘤鼠僅少量的CTL浸潤(rùn)。circ_0020710 / miR-370-3p / CXCL12軸誘導(dǎo)了免疫抑制微環(huán)境。皮下異種移植腫瘤小鼠進(jìn)行抗PD-1、CXCL12/CXCR4抑制劑AMD3100治療，抗PD-1和AMD3100組合明顯抑制腫瘤生長(zhǎng)，預(yù)后最好。以上表明circ_0020710 / CXCL12軸促進(jìn)抗PD-1治療療效。
