大鼠主動脈平滑肌細胞 RASMC

   血管平滑肌細胞在血管疾病研究中起到重要作用，并且可以被用來界定治療動脈疾病新的治療靶標(biāo)。

   RASMC是從大鼠主動脈分離得到的，原代凍存，冰凍運輸。每管細胞密度超過5×10^5/ml。細胞特性經(jīng)α-平滑肌肌動蛋白和肌間線蛋白免疫熒光鑒定。本細胞經(jīng)檢測不含支原體、細菌、酵母菌和真菌。如采用ScienCell實驗室提供的實驗條件，可保證此細胞5倍增增殖。

   方法取SD大鼠胸、腹主動脈,用酶液Ⅰ(木瓜蛋白酶等)、酶液Ⅱ(膠原酶和透明質(zhì)酸酶等)酶解分離平滑肌細胞,酶液Ⅰ、Ⅱ的消化時間分別選取10、15、20、25、30 min,并兩兩組合以確定最佳消化時間。分離的細胞經(jīng)臺盼藍染色測定其活性并通過平滑肌特異性α-肌動蛋白(α-actin)免疫組化染色鑒定。結(jié)果分離的平滑肌細胞在倒置顯微鏡下計數(shù),酶液Ⅰ、Ⅱ的消化時間分別在30、15 min時平滑肌細胞數(shù)量最多為(18.3±1.5)個/低倍視野,與其他各時間點組合相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。鏡下觀察典型的平滑肌細胞呈長梭形,細胞膜完整,邊緣光滑;臺盼藍染色,90%以上的細胞為活細胞;免疫組化染色鑒定為平滑肌細胞。結(jié)論酶消化法分離獲取SD大鼠平滑肌細胞方法簡單、成本低,采用本法可獲得較大量的平滑肌細胞供實驗使用。