microRNA實(shí)驗(yàn)85折促銷（microRNA靶基因驗(yàn)證，定量PCR，microRNA-Seq，microRNA靶基因分析）

                          做microRNA報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)免費(fèi)贈(zèng)送生物信息學(xué)服務(wù)！

                                                   microRNA定量PCR 40元/孔！
                                                    microRNA-Seq  4500元/樣本（10M reads）!

    
    英拜生物可為您提供microRNA生物信息學(xué)分析到報(bào)告基因載體構(gòu)建、檢測(cè)服務(wù)整套服務(wù)，可加速科研人員對(duì)microRNA的功能研究。深入的生物信息學(xué)分析不僅可以為microRNA功能研究指引方向，也是解析microRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的必備利器。
本公司采用 的psiCHECK-2報(bào)告基因載體，具有多克隆位點(diǎn)，方便插入目的靶點(diǎn)序列，用于終點(diǎn)法的細(xì)胞裂解物檢測(cè)，包含螢火蟲(chóng)熒光素酶基因，使海腎熒光素酶的表達(dá)水平歸一化，所以無(wú)須通過(guò)共轉(zhuǎn)染進(jìn)行歸一化，令該系統(tǒng)更可靠、重現(xiàn)性更好。本公司專業(yè)技術(shù)服務(wù)人員就可替您完成載體構(gòu)建，為您節(jié)省大量的時(shí)間和精力。


英拜生物microRNA報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)流程：
1.microRNA靶點(diǎn)的預(yù)測(cè)
利用Targetscan,miRanda,Microcosm,Pita等軟件得到目的microRNA的預(yù)測(cè)靶點(diǎn)序列(客戶提供或由我公司預(yù)測(cè))。
2.獲得microRNA靶點(diǎn)序列
根據(jù)提供的靶序列，合成兩條互補(bǔ)的單鏈DNA模板?；蛘撸O(shè)計(jì)引物PCR擴(kuò)增目的microRNA靶基因3’UTR序列。
3.microRNA靶序列克隆
將合成的兩條單鏈退火成雙鏈（具有粘性末端），或?qū)CR產(chǎn)物雙酶切，后連入經(jīng)過(guò)同樣雙酶切的psicheck報(bào)告基因載體中，連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α。
4.陽(yáng)性克隆鑒定。
挑選轉(zhuǎn)化的菌落，雙酶切鑒定陽(yáng)性克隆，并測(cè)序驗(yàn)證克隆的序列和目的microRNA靶序列一致。
5.細(xì)胞轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備
將含目的microRNA靶基因的psicheck報(bào)告基因載體和microRNA mimics或microRNA negative control共轉(zhuǎn)染293T或Hela細(xì)胞。
6.熒光素酶檢測(cè)
共轉(zhuǎn)染細(xì)胞24-72h后，進(jìn)行雙熒光素酶檢測(cè)。
7.整理分析數(shù)據(jù)，得出結(jié)論。
提供有microRNA靶序列的報(bào)告質(zhì)粒一份,甘油保存菌株各一支。附實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括載體構(gòu)建過(guò)程，鑒定記錄，測(cè)序報(bào)告，細(xì)胞轉(zhuǎn)染，熒光檢測(cè)。

在本公司做microRNA靶基因報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)，可以享受a-f中一項(xiàng)免費(fèi)生物信息學(xué)服務(wù)：

a)差異表達(dá)microRNA的篩選和聚類分析
b)microRNA靶基因預(yù)測(cè)
c)microRNA與靶標(biāo)基因的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建
d)microRNA與編碼蛋白基因共轉(zhuǎn)錄預(yù)測(cè)
e)microRNA與GO的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建
f)microRNA與KEGG Pathway的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建
g)microRNA甲基化位點(diǎn)預(yù)測(cè)
h)microRNA轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)預(yù)測(cè)
i)microRNA與轉(zhuǎn)錄因子相互調(diào)控網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建
j)轉(zhuǎn)錄因子與microRNA靶標(biāo)基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建
k)microRNA 、轉(zhuǎn)錄因子與靶標(biāo)基因三者復(fù)雜調(diào)控網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建