lncRNA驅(qū)動白血病細(xì)胞干性
導(dǎo)語：
混合譜系白血?。∕LL）基因重排觸發(fā)異常表觀遺傳修飾，產(chǎn)生了最具攻擊性的自我更新能力強的亞型之一，抑制重排的MLL仍是一個挑戰(zhàn)。lncRNA已被證明是細(xì)胞代謝過程中的關(guān)鍵調(diào)控因子，影響染色質(zhì)表觀遺傳修飾、蛋白質(zhì)復(fù)合物的組成和蛋白質(zhì)翻譯或退化。lncRNAs是否能特異性地在自我更新與分化的平衡中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用，小編帶你了解下。
思路:
結(jié)果:
1. LAMP5-AS1是維持自我更新對抗MLL白血病細(xì)胞分化所必須
MLL白血病患者和MLL易位的白血病細(xì)胞系中LAMP5-AS1表達(dá)明顯更高，為研究LAMP5-AS1是否影響白血病細(xì)胞自我更新和分化，MLL原代細(xì)胞敲低LAMP5-AS1，被誘導(dǎo)向淋巴細(xì)胞或單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞分化，增殖減弱。進一步分離原代MLL CD34 +細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)敲低LAMP5-AS1促進分化，增殖減弱。表明敲低LAMP5-AS1抑制MLL白血病細(xì)胞自我更新能力和促進分化。
2. LAMP5-AS1促進MLL驅(qū)動的白血病進展
建立異種移植模型，敲低LAMP5-AS1的MLL細(xì)胞注射小鼠的骨髓、脾臟和肝臟中MLL白血病細(xì)胞的數(shù)量明顯減少，細(xì)胞器官浸潤能力減弱，表明LAMP5-AS1抑制削弱了MLL白血病細(xì)胞浸潤；分化標(biāo)記物CD11b和CD14急劇增加，表明LAMP5-AS1是抑制細(xì)胞分化必需；sh-LAMP5-AS1組小鼠的存活時間長，表明LAMP5-AS1敲低可抑制MLL白血病的進展。移植后第4周sh-LAMP5-AS1小鼠體內(nèi)具有自我更新能力的MOLM13細(xì)胞的數(shù)量大大降低?？傊琇AMP5-AS1是在MLL白血病中高表達(dá)的lncRNA，促進自我更新能力和抑制分化。
3. LAMP5-AS1直接與H3K79甲基轉(zhuǎn)移酶DOT1L結(jié)合
RNA下拉測定與質(zhì)譜聯(lián)用識別與lncRNA相互作用的蛋白質(zhì)。LAMP5-AS1與DOT1L有強相互作用，共定位于細(xì)胞核，lncRNA的503-1036 nt綁定到DOT1L。390-407 氨基酸區(qū)域是DOT1L (1-416aa)催化H3K79甲基化重要區(qū)域，可與LAMP5-AS1的503-1036 nt互作。
4. LAMP5-AS1影響DOT1L的甲基轉(zhuǎn)移酶活性
人DOT1L的1-416aa區(qū)域與全長LAMP5-AS1形成復(fù)合體，H3K79me3甲基化更高。LAMP5-AS1通過增強DOT1L的甲基轉(zhuǎn)移酶活性提升MLL白血病細(xì)胞自我更新能力。
5. LAMP5-AS1調(diào)節(jié)MLL融合蛋白靶基的因H3K79me2 /3
LAMP5-AS1敲低降低了MOLM13及原發(fā)性MLL白血病細(xì)胞中的H3K79me2和H3K79me3水平，LAMP5-AS1參與MLL白血病中基因組或H3K79me2 / 3修飾調(diào)控。在HOXA基因簇的位置，CDK6和MEIS1是MLL融合蛋白的核心靶基因，H3K79me3和H3K79me2大幅減少。下調(diào)LAMP5-AS1可影響DOT1L的甲基轉(zhuǎn)移酶活性，并阻止白血病中大部分MLL融合靶基因的H3K79me2/3。表明LAMP5-AS1通過上調(diào)MLL白血病細(xì)胞中H3K79me2/me3和DOT1L異位靶基因的轉(zhuǎn)錄來促進自我更新和阻止分化。
6. LAMP5-AS1可預(yù)測MLL白血病不良預(yù)后
LAMP5-AS1在MLL白血病群體中表達(dá)最高，LAMP5-AS1與MLL融合蛋白水平有顯著正相關(guān)，較高水平的LAMP5-AS1可能會導(dǎo)致5年無白血病生存期縮短。這些表明LAMP5-AS1與MLL白血病不良預(yù)后顯著相關(guān)，lncRNA可作為MLL白血病的診斷和預(yù)后標(biāo)志物。
