頭頸部鱗狀細(xì)胞癌的免疫相關(guān)基因預(yù)后指標(biāo)
研究背景：免疫檢查點(diǎn)抑制劑(ICI)治療，如針對(duì)PD-L1、PD1和細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)蛋白4 (CTLA4)的治療，已顯示出顯著的生存優(yōu)勢(shì)。但是患者對(duì)ICI治療的反應(yīng)率低，高醫(yī)療費(fèi)用限制其應(yīng)用。研究發(fā)現(xiàn)免疫微環(huán)境(TME)等多種因素影響ICI的有效性。了解頭頸部鱗狀細(xì)胞癌(HNSCC)的TME，并找到有價(jià)值的生物標(biāo)志物預(yù)測(cè)免疫治療對(duì)HNSCC患者的個(gè)體化作用具有重要意義。中山大學(xué)腫瘤中心陳月等分析了免疫相關(guān)基因預(yù)后指數(shù)(IRGPI) 在HNSCC的免疫治療中的預(yù)后能力（Clin Cancer Res /10.107）。
技術(shù)路線圖：
研究結(jié)果：
在差異表達(dá)分析中(502例腫瘤vs 44例正常樣本)，將得到3877個(gè)差異表達(dá)基因與從ImmPort和InnateDB中獲得免疫相關(guān)基因進(jìn)行比較分析，得到差異表達(dá)的免疫相關(guān)基因1131個(gè)，其中上調(diào)基因860個(gè)，下調(diào)基因271個(gè)。對(duì)候選基因進(jìn)行WGCNA分析獲得免疫相關(guān)基因(n = 1131)。度數(shù)為k的節(jié)點(diǎn)個(gè)數(shù)的對(duì)數(shù)值log(k), 與該節(jié)點(diǎn)出現(xiàn)的概率對(duì)數(shù)(log(p(k)))呈現(xiàn)負(fù)相關(guān), 相關(guān)系數(shù)大于0.85。1131個(gè)基因被分配到7個(gè)模塊中。根據(jù)Pierson相關(guān)系數(shù)，藍(lán)色和藍(lán)綠色模塊與HNSCC腫瘤密切相關(guān)，閾值>20的前50個(gè)免疫相關(guān)中樞基因. K-M分析結(jié)果顯示，22個(gè)免疫相關(guān)基因的表達(dá)與HNSCC患者OS密切相關(guān)，顯著富集在糖尿病并發(fā)癥中的AGE-RAGE信號(hào)通路、在癌癥中的轉(zhuǎn)錄錯(cuò)誤和長壽調(diào)節(jié)通路
2. 不同IRGPI組的生存結(jié)果
多因素COX回歸分析22個(gè)免疫相關(guān)中樞基因中的獨(dú)立預(yù)后基因。如圖1A和1B，SFRP4、CPXM1和COL5A1這3個(gè)基因顯著影響HNSCC患者的OS。單因素Cox回歸分析顯示年齡、IRGPI、HPV狀態(tài)和分期與HNSCC的預(yù)后顯著相關(guān)。多因素Cox回歸分析證實(shí)，在校正了其他臨床病理因素后，IRGPI是獨(dú)立的預(yù)后因素(圖1C)。高IRGPI患者的OS優(yōu)于低IRGPI患者 (圖1D)。然后，使用HNSCC數(shù)據(jù)集(n = 270)驗(yàn)證IRGPI的作用。如圖1E所示，IRGPI高亞組患者預(yù)后明顯優(yōu)于IRGPI低亞組患者。
3. 不同IRGPI亞群的分子特征
GSEA分析顯示，高IRGPI樣本的基因集富集于DNA修復(fù)和免疫應(yīng)答相關(guān)通路(圖2A)，而低IRGPI樣本的基因集在腫瘤和腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)通路中富集(圖2B)。之后，文章分析了基因突變以進(jìn)一步了解IRGPI亞群的免疫學(xué)特征。高IRGPI組的突變數(shù)明顯高于IRGPI低亞組；并確定了IRGPI亞群中突變率最高的10個(gè)基因(圖2C)。兩組中TP53、TTN、CDKN2A、CSMD3、FRG1B、MUC16、NOTCH1、FAT1的突變率均高于15%。在高IRGPI亞群中SYNE1和NSD1基因的突變常見，而在-低IRGPI亞群中PIK3CA和LRP1B基因的突變更為常見。文章又探討了IRGPI評(píng)分與PD-L1表達(dá)及TMB之間的關(guān)系。發(fā)現(xiàn)IRGPI評(píng)分與TMB略有相關(guān)，而IRGPI評(píng)分與PD-L1無顯著相關(guān)關(guān)系。
4. 不同IRGPI亞群的免疫特性
為分析不同IRGPI亞群中免疫細(xì)胞的組成，文章采用Wilcoxon檢驗(yàn)比較不同IRGPI亞群中免疫細(xì)胞的分布。我們發(fā)現(xiàn)CD8 T細(xì)胞，初始CD4 T細(xì)胞，激活記憶CD4 T細(xì)胞、休眠NK細(xì)胞和M1巨噬細(xì)胞在高IRGPI亞群中含量豐富，而IRGPI-低亞組以原始B細(xì)胞、休眠記憶CD4 T細(xì)胞和M2巨噬細(xì)胞為主(圖3A)。圖3B顯示了與免疫表型相關(guān)的特征，包括不同IRGPI亞群的臨床病理特征。文章應(yīng)用特定的基因標(biāo)記定義不同IRGPI亞群之間的免疫和分子功能。在高水平組中CD8 T細(xì)胞、MHC I類細(xì)胞、損傷修復(fù)細(xì)胞較多；而在低水平組中，免疫抑制細(xì)胞和信號(hào)以及腫瘤和轉(zhuǎn)移相關(guān)信號(hào)較多。而且，上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化、TGF-和WNT相關(guān)信號(hào)評(píng)分越高的患者預(yù)后越差，而P53突變?cè)蕉唷?/span>CD8 T細(xì)胞越多、M1巨噬細(xì)胞越多的患者預(yù)后越好；說明IRGPI的預(yù)后價(jià)值可能源于較好免疫控制和腫瘤生長侵襲性降低。
5. IRGPI組與其它分子亞型和免疫分型的關(guān)系
HNSCC包括三種免疫亞型:非免疫亞型、免疫衰竭亞型和免疫活性亞型。從圖4A中我們可以發(fā)現(xiàn)，兩組非免疫樣本的比例幾乎是均等的，但高IRGPI組的免疫活性樣本多于低IRGPI組的免疫衰竭樣本。圖4B中可以看出，低IRGPI中IS1、IS5亞型較多，而高IRGPI中IS4亞型較多。在大規(guī)模的HNSCC基因組分析研究IRGPI組中四種不同的分子亞型，即非典型、基礎(chǔ)、經(jīng)典和間質(zhì)的分布。低IRGPI組包括16%的非典型樣本，22%的基礎(chǔ)樣本，19%的經(jīng)典樣本和43%的間質(zhì)亞型樣本，而高IRGPI組包括36%的非典型樣本，37%的基礎(chǔ)樣本，15%的經(jīng)典樣本和13%的間質(zhì)樣本(圖4C)。典型亞型在兩組間幾乎均勻分布，但高IRGPI組的非典典性和基底性標(biāo)本多于低IRGPI組，間質(zhì)標(biāo)本較少。
6. ICI治療不同IRGPI亞組的療效
TIDE評(píng)估免疫治療在不同IRGPI亞群中的潛在臨床療效。TIDE預(yù)測(cè)得分越高，表示免疫逃避可能性越高，提示患者從ICI治療中獲益的可能性越小。如圖5高IRGPI組的TIDE評(píng)分低于低IRGPI組，提示高IRGPI患者比低IRGPI患者更能從ICI治療中獲益。低TIDE分?jǐn)?shù)高的IRGPI組可能比高TIDE分?jǐn)?shù)低的IRGPI組有更好的預(yù)后。同時(shí)，文章發(fā)現(xiàn)IRGPI-高亞組有較高的微衛(wèi)星不穩(wěn)定性(MSI)評(píng)分，而IRGPI-低亞組有較高的T細(xì)胞排斥評(píng)分，但在T細(xì)胞功能障礙方面兩亞組無差異。此外，我們?cè)u(píng)估了抗PDL-1治療的兩組UC患者中IRGPI的預(yù)后價(jià)值(16,17)。從圖5B和圖5C可以看出，高IRGPI患者比低IRGPI患者的OS更好。
TIS組在12個(gè)月和18個(gè)月的隨訪中AUCs更好，IRGPI組在18個(gè)月和24個(gè)月的隨訪中AUCs更好。因此，我們認(rèn)為在兩個(gè)組中，IRGPI對(duì)OS的預(yù)測(cè)價(jià)值與18基因t細(xì)胞炎癥標(biāo)記(TIS)和TIDE相當(dāng)。
