結(jié)腸直腸癌中m6A閱讀器IMP2穩(wěn)定ZFAS1/OLA1軸并激活Warburg效應(yīng)
越來(lái)越多的證據(jù)表明，n6 -亞甲基腺苷(m6A)調(diào)節(jié)劑參與了結(jié)直腸癌(CRC)的病因和進(jìn)展。然而，m6A閱讀器參與糖酵解代謝的確切機(jī)制仍不清楚。本文旨在通過(guò)m6A與糖酵解代謝的交互作用，揭示CRC進(jìn)展的新機(jī)制。
本文技術(shù)路線：
1、CRC細(xì)胞和組織中IMP1/2/3表達(dá)與異常調(diào)節(jié)的LncRNAs的相關(guān)性
IMP屬于一種m6A閱讀器，在CRC中IMP1/2/3家族如何識(shí)別lncRNAs尚未被探索。作者首先分析了IMP1，IMP2，IMP3在CRC組織中的表達(dá)量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在CRC組織中，只有IMP2過(guò)表達(dá)，且其表達(dá)量遠(yuǎn)高于IMP1和IMP3（Fig 1B）。在7個(gè)CRC細(xì)胞系中(LOVO，CACO2、SW48、SW480、HT29、HCT116和SW620)，IMP2的表達(dá)量均高于正常人腸上皮細(xì)胞系(HIEC) (Fig. 1c)。m6A斑點(diǎn)雜交實(shí)驗(yàn)顯示CRC細(xì)胞系，特別是HCT116，SW620，HT29細(xì)胞株的m6A水平顯著高于正常的結(jié)直腸上皮細(xì)胞HIEC中m6A水平(Fig. 1d)。這也符合IMP2的功能，即穩(wěn)定RNA表達(dá)，增加總RNA的m6A水平。然后，通過(guò)TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)和GEO數(shù)據(jù)庫(kù)分析發(fā)現(xiàn)，在CRC中，7個(gè)lncRNA候選基因中，ZFAS1、SNHG15和CRNDE均顯著表達(dá)。在CRC細(xì)胞中，ZFAS1表現(xiàn)出最顯著的過(guò)表達(dá)(Fig. 1e)。通過(guò)檢測(cè)正常對(duì)照細(xì)胞HIEC和CRC細(xì)胞系（HCT116、SW620、SW480、LOVO、HT29、CACO2、SW48）中ZFAS1、CRNDE和SNHG15的RNA表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)在CRC細(xì)胞中，ZFAS1表達(dá)量顯著上升(Fig. 1f)。然后，對(duì)IMP1/2/3與ZFAS1進(jìn)行相關(guān)性研究，結(jié)果表明，ZFAS1與IMP2呈顯著正相關(guān)(R = 0.6476, P < 0.0001, Fig. 1g)。但ZFAS1和IMP1或IMP3之間沒(méi)有明顯的相關(guān)性。
接下來(lái)，為了研究IMP2在ZFAS1表達(dá)及其相關(guān)m6A甲基化水平中的潛在作用，作者采用組織芯片(TMA)、RNA原位雜交(ISH)和免疫組織化學(xué)(IHC)檢測(cè)了在配對(duì)的CRC組織和匹配的鄰近腫瘤對(duì)照中IMP2、m6A、和ZFAS1的表達(dá)水平(Fig. 1h)。CRC組織中IMP2, ZFAS1的表達(dá)量以及m6A表達(dá)水平明顯增高(Fig. 1i)。進(jìn)一步進(jìn)行相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，IMP2和ZFAS1表達(dá)量以及m6A水平正相關(guān)(Fig. 1j)。
通過(guò)臨床分析發(fā)現(xiàn)，上調(diào)的IMP2表達(dá)顯著縮短了總生存期和無(wú)病生存，同樣，m6A甲基化的高表達(dá)與總生存期短顯著相關(guān)，同時(shí)， ZFAS1表達(dá)較高的患者總生存期和無(wú)病生存期顯著降低(Fig. 1k)。
這些結(jié)果表明，在人類(lèi)CRC細(xì)胞和組織中，IMP2過(guò)表達(dá)，并伴有相關(guān)的m6A甲基化水平和ZFAS1表達(dá)。這些指標(biāo)也顯示出未來(lái)作為CRC評(píng)估和治療生物標(biāo)志物的獨(dú)立預(yù)后預(yù)測(cè)因子的潛在功能。
Fig1 CRC細(xì)胞及患者組織中IMP1/2/3與lncRANs表達(dá)的關(guān)系
2 IMP2通過(guò)直接結(jié)合結(jié)直腸癌細(xì)胞中ZFAS1的m6A位點(diǎn)，促進(jìn)ZFAS1的穩(wěn)定性
為了探究IMP2介導(dǎo)的m6A穩(wěn)定性及其相關(guān)ZFAS1表達(dá)在CRC腫瘤發(fā)生和發(fā)展中的關(guān)鍵生物學(xué)特性，作者在HCT116和SW620 CRC細(xì)胞系中干擾IMP2表達(dá)，然后檢測(cè)IMP2和ZFAS1的表達(dá)量。結(jié)果表明，異位的IMP2表達(dá)顯著增強(qiáng)了ZFAS1和IMP2的表達(dá)。然而，IMP2敲低抑制了ZFAS1和IMP2的表達(dá)(Fig. 2b )。此外，在挽救實(shí)驗(yàn)中，在IMP2敲低的CRC細(xì)胞中上調(diào)ZFAS1檢測(cè)到ZFAS1表達(dá)恢復(fù)(Fig. 2C )。更重要的是，RNA穩(wěn)定性分析發(fā)現(xiàn)IMP2敲低或放線菌素D在不同時(shí)間點(diǎn)(0,2,4,6 h) 進(jìn)行處理都會(huì)縮短ZFAS1 RNA的半衰期(Fig. 2D )。這些結(jié)果初步確信，作為m6A閱讀器的IMP2對(duì)ZFAS1具有穩(wěn)定作用。為了驗(yàn)證IMP2和ZFAS1之間的直接關(guān)系，通過(guò)RIP-seq發(fā)現(xiàn)，在HEK293T細(xì)胞中，異位IMP2表達(dá)顯著富集了內(nèi)源性ZFAS1(Fig. 2e)。此外，CLIP數(shù)據(jù)庫(kù)顯示IMP2蛋白具有特定的結(jié)合域識(shí)別ZFAS1序列中的m6A的RGGAC/ rach基序(Fig. 2F)。
同樣，通過(guò)Cuilab進(jìn)行生信分析在ZFAS1基因中成功地發(fā)現(xiàn)了4個(gè)m6A結(jié)合基序RGGAC和1個(gè)m6A結(jié)合基序RAGAC(Fig. 2g)。catRAPID和MOE平臺(tái)也被用來(lái)確定在二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)水平上的直接結(jié)合域(Fig. 2h, i)。ZFAS1的“RGGAC”基序(+833 ~ +869)與IMP2 蛋白序列的KH3-4結(jié)構(gòu)域(+198 ~ +249)具有顯著的交互傾向性(值= 206)和識(shí)別能力(100%)，其交互強(qiáng)度為98% (Fig. 2h)。
MOE軟件分析了識(shí)別 ZFAS1的RGGAC/RRACH基序與IMP2 KH3-4氨基酸結(jié)構(gòu)域交互(Fig. 2i)。采用ISH和免疫熒光(IF)進(jìn)行共定位，證實(shí)ZFAS1和IMP2的表達(dá)分布一致，在HCT116和SW620細(xì)胞中都顯示主要分布在細(xì)胞質(zhì)中，部分分布在細(xì)胞核中(Fig. 2j)。此外，RIP實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，m6A抗體孵育得到了富集的ZFAS1 (Fig. 2k)。此外，作者合成了包含RGGAC/ rach識(shí)別motif (ZFAS1 m6A-WT)以及含有相應(yīng)的突變序列(ZFAS1 m6A-Mut)的具有生物素標(biāo)記的ZFAS1探針(Fig. 2m)。然后通過(guò)RNA-down實(shí)驗(yàn)證實(shí)IMP2蛋白結(jié)合的是ZFAS1 m6A-WT，但不是ZFAS1m6A -Mut，而這種富集在IMP2敲低之后會(huì)消除(Fig. 2m)，表明m6A識(shí)別基序與IMP2蛋白特異性結(jié)構(gòu)域直接結(jié)合相互作用。
為了確認(rèn)ZFAS1是否由IMP2 KH3-4結(jié)構(gòu)域識(shí)別m6A基序，用IMP2 KH3-4 WT或Mut載體處理HEK-293 T細(xì)胞后進(jìn)行qPCR檢測(cè)，用IMP2 KH3-4 Mut載體處理后，ZFAS1表達(dá)明顯減少(Fig. 2l)。隨后，我們對(duì)ZFAS1上的m6A位點(diǎn)(+833 ~ +869)進(jìn)行突變，檢測(cè)ZFAS1的穩(wěn)定性，其穩(wěn)定性也顯著降低（Fig. 2n）。到目前為止，已經(jīng)證實(shí)了IMP2通過(guò)KH3-4直接與ZFAS1的m6A位點(diǎn)結(jié)合，增強(qiáng)了ZFAS1的穩(wěn)定性(Fig. 2a)。
Fig2 IMP2通過(guò)直接與ZFAS1的m6A位點(diǎn)結(jié)合來(lái)提高ZFAS1的穩(wěn)定性
3 IMP2通過(guò)調(diào)節(jié)ZFAS1在結(jié)直腸癌細(xì)胞中的表達(dá)進(jìn)而調(diào)節(jié)生物學(xué)特性
在本研究中，為進(jìn)一步闡明IMP2和ZFAS1在CRC細(xì)胞中了調(diào)控模式，通過(guò)MTT檢測(cè)在HCT116 和SW620 CRC細(xì)胞系中分析了干擾IMP2表達(dá)后細(xì)胞的增殖能力(Fig. 3b)和集落形成能力(Fig. 3C)。不出所料，異位表達(dá)的IMP2顯著促進(jìn)了HCT116和SW620細(xì)胞的細(xì)胞生長(zhǎng)和菌落形成能力，IMP2缺失抑制了這兩種類(lèi)型的結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖能力和結(jié)腸能力（Fig. 3b, c）。此外，通過(guò)Trans-well實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其侵襲能力，結(jié)果顯示當(dāng)沉默IMP2時(shí)，遷移細(xì)胞被顯著抑制。相反，IMP2過(guò)表達(dá)顯著提高了HCT116和SW620 CRC細(xì)胞的侵襲能力(Fig. 3d)。此外，IMP2敲除增加了細(xì)胞凋亡率。然而，經(jīng)過(guò)流式細(xì)胞PE / 7 AAD雙重染色后檢測(cè)顯示，在HCT116和SW620 CRC細(xì)胞中，IMP2過(guò)表達(dá)顯著抑制了細(xì)胞凋亡率(Fig. 3e)。
為進(jìn)一步確立IMP2是否影響ZFAS1在CRC細(xì)胞中的表達(dá)及其可能的生物學(xué)功能，通過(guò)在IMP2敲低的CRC細(xì)胞中增強(qiáng)ZFAS1的表達(dá)進(jìn)行挽救實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示ZFAS1過(guò)表達(dá)逆轉(zhuǎn)了HCT116和SW620 的分子特征包括細(xì)胞增殖能力、細(xì)胞集落形成能力、細(xì)胞遷移能力和凋亡率(Fig. 3f)。因此，這些結(jié)果表明IMP2通過(guò)促進(jìn)ZFAS1的穩(wěn)定性和表達(dá)，促進(jìn)CRC細(xì)胞增殖，抑制CRC細(xì)胞凋亡，促進(jìn)細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移，而IMP2可以通過(guò)調(diào)節(jié)ZFAS1的表達(dá)來(lái)恢復(fù)其對(duì)細(xì)胞表型的影響。
Fig3 IMP2通過(guò)調(diào)節(jié)結(jié)直腸癌細(xì)胞中ZFAS1的表達(dá)介導(dǎo)生物學(xué)特性
4 在CRC細(xì)胞中，IMP2通過(guò)OLA1作為穩(wěn)定ZFAS1的關(guān)鍵靶點(diǎn)
為挖掘ZFAS1下游影響CRC細(xì)胞表型和功能的靶點(diǎn)，對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)功能研究。首先，通過(guò)熱圖聚類(lèi)分析，富集了與ZFAS1過(guò)表達(dá)呈正相關(guān)的潛在下游靶點(diǎn)(Fig. 4b) 并且通過(guò)結(jié)合GSE128435和TCGA數(shù)據(jù)集進(jìn)一步擴(kuò)展CRC樣本(Fig. 4a)。發(fā)現(xiàn)線粒體能量代謝相關(guān)基因OLA1恰好出現(xiàn)在這些共表達(dá)靶點(diǎn)的交叉部位(Fig. 4a)。進(jìn)一步檢測(cè)發(fā)現(xiàn)與HIEC對(duì)照相比，OLA1在7個(gè)CRC細(xì)胞株中顯著過(guò)表達(dá)，包括SW480、HT29、LOVO、CACO2、SW48、HCT116和SW620(Fig. 4c)。通過(guò)qPCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，與癌旁組織相比，CRC組織中OLA1水平升高(Fig. 4d)。
采用TMA和IHC檢測(cè)OLA1表達(dá)水平，如預(yù)期的那樣，標(biāo)記的OLA1水平在CRC組織與那些匹配的腫瘤鄰近對(duì)照相比，顯示了一個(gè)致癌基因的特性(Fig. 4e, f)。OLA1表達(dá)量與ZFAS1表達(dá)量呈線性正相關(guān)(Fig. 4g)。同樣，在TCGA中，OLA1和ZFAS1在CRC組織中的表達(dá)高度一致，呈線性正相關(guān)(R2 = 0.27, P < 0.0001)。臨床病理參數(shù)的相關(guān)性分析證實(shí)，OLA1低表達(dá)的患者在存活的患者中比例較高(Fig. 4h)。而OLA1的高表達(dá)顯著縮短了患者無(wú)病生存期以及總生存期(Fig. 4i)。為了驗(yàn)證OLA1確實(shí)是被IMP2穩(wěn)定的ZFAS1的下游靶點(diǎn)，我們檢測(cè)了干擾IMP2后OLA1的mRNA和蛋白表達(dá)情況。有趣的是，IMP2沉默/過(guò)表達(dá)不僅降低/增加了OLA1 mRNA的表達(dá)，同時(shí)也降低或增加了OLA1的表達(dá)。然而，IMP2對(duì)OLA1的影響可以被ZFAS1完全逆轉(zhuǎn)(Fig. 4j–l)。因此，這些發(fā)現(xiàn)表明在人結(jié)直腸癌細(xì)胞和組織中，m6A修飾和m6A穩(wěn)定的ZFAS1表達(dá)正調(diào)控OLA1。進(jìn)一步的預(yù)后評(píng)估表明，OLA1可以作為預(yù)測(cè)CRC臨床結(jié)局的潛在生物標(biāo)志物。
Fig4 在CRC細(xì)胞中，OLA1是經(jīng)IMP2穩(wěn)定的ZFAS1的下游關(guān)鍵靶點(diǎn)
5 ZFAS1通過(guò)與OLA1 OBG型功能域結(jié)合，增強(qiáng)OLA1活性并激活糖酵解
在之前的研究中，我們已經(jīng)確定ZFAS1與OLA1的表達(dá)呈正相關(guān)。然而，依然未明確ZFAS1與OLA1的相互作用途徑。于是作者通過(guò)ISH和IF進(jìn)行檢測(cè)，細(xì)胞共定位顯示，OLA1和ZFAS1不僅在HCT116和SW620 CRC細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分布一致，而且在細(xì)胞核中分布一致(Fig. 5b)。為了確定ZFAS1與OLA1是否有直接的結(jié)合位點(diǎn)，并檢測(cè)ZFAS1中關(guān)鍵m6A位點(diǎn)對(duì)OLA1的影響，作者將ZFAS1中的3個(gè)A堿基(+833 ~ +869)替換為U堿基，并重新預(yù)測(cè)ZFAS1的三級(jí)結(jié)構(gòu)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)ZFAS1-WT和ZFAS1-Mut都與OLA1 OBG型功能域結(jié)合，然而，ZFAS1-WT和OLA1的結(jié)合強(qiáng)度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高ZFAS1-Mut和OLA1的結(jié)合。此外，ZFAS1-WT與OLA1結(jié)合充分暴露OLA1的ATP結(jié)合位點(diǎn)(NVGKST, 32-37) (Fig. 5c)。
此后，Pull down實(shí)驗(yàn)表明，是ZFAS1-WT探針，但非ZFAS1- mut與OLA1結(jié)合，當(dāng)ZFAS1上的m6A位點(diǎn)(+833 ~ +869)發(fā)生突變時(shí)，ZFAS1- wt探針不能再拉下OLA1 (Fig. 5d)。當(dāng)ZFAS1的關(guān)鍵m6A位點(diǎn)發(fā)生突變時(shí)，ZFAS1對(duì)OLA1 atp酶活性的恢復(fù)效果消失(Fig. 5e)。這也證明了ZFAS1對(duì)OLA1 ATP酶活的促進(jìn)作用取決于ZFAS1與OLA1結(jié)合暴露OLA1的ATP結(jié)合位點(diǎn)。
為了探討OLA1 ATP酶活性變化對(duì)CRC細(xì)胞能量代謝的影響，作者檢測(cè)了HCT116和SW620細(xì)胞中乳酸和ATP含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，OLA1表達(dá)的降低不僅可以減少結(jié)直腸癌細(xì)胞中乳酸積累，還可以降低細(xì)胞中ATP含量；然而，ZFAS1 -WT能恢復(fù)OLA1不足帶來(lái)的影響 (Fig. 5f, g)。這一結(jié)果與OLA1的ATP水解功能相矛盾，于是推測(cè)ATP產(chǎn)生的主要途徑是否被阻斷了。為了驗(yàn)證這一推測(cè)，作者進(jìn)行了細(xì)胞外酸化率實(shí)驗(yàn)，以檢測(cè)OLA1的變化對(duì)CRC細(xì)胞糖酵解能力的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，降低OLA1的表達(dá)可顯著降低CRC細(xì)胞的糖酵解能力，而ZFAS1-WT而可以恢復(fù)OLA1表達(dá)減少對(duì)CRC細(xì)胞糖酵解能力降低的影響(Fig. 5h)。
綜上所述，ZFAS1可以直接與OLA1的OBGtype功能域結(jié)合，暴露OLA1上的ATPbinding位點(diǎn)，從而增強(qiáng)OLA1的ATP水解能力。OLA1增強(qiáng)ATP水解能力，促進(jìn)乳酸的積累和ATP合成原料的釋放，從而激活CRC細(xì)胞的糖酵解途徑，最終促進(jìn)CRC中能量的釋放。
Fig 5 ZFAS1通過(guò)與OLA1 OBG型結(jié)構(gòu)域結(jié)合增強(qiáng)OLA1活性并激活糖酵解
6 線粒體能量代謝受IMP2-ZFAS1-OLA1信號(hào)轉(zhuǎn)軸的影響
為了進(jìn)一步闡明在CRC進(jìn)展過(guò)程中參與線粒體能量代謝的IMP2穩(wěn)定信號(hào)軸的關(guān)鍵功能，首先在電子顯微鏡下觀察了IMP2沉默后線粒體的形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果顯示，在CRC細(xì)胞中，IMP2沉默后，線粒體明顯腫脹和受損，線粒體形態(tài)恢復(fù)正常(Fig. 6b)。也就是說(shuō)，在CRC中，大多數(shù)細(xì)胞只能依賴(lài)糖酵解提供能量，而IMP2沉默后，CRC細(xì)胞的糖酵解能量比例會(huì)顯著降低。為了驗(yàn)證我們的猜想，我們首先用IMP2進(jìn)行干預(yù)，檢測(cè)HK2（糖酵解的關(guān)鍵蛋白質(zhì)）和PDHA1（氧化磷酸化的關(guān)鍵蛋白）的表達(dá)。結(jié)果顯示，IMP2過(guò)表達(dá)促進(jìn)HK2表達(dá)，抑制PDHA1表達(dá)(Fig. 6c)。IMP2沉默可顯著降低HCT116和SW620 CRC中HK2的表達(dá)，增加PDHA1的表達(dá)(Fig. 6c)。此外，在CRC細(xì)胞中，ZFAS1沉默/過(guò)表達(dá)及IMP2過(guò)表達(dá)/沉默后，HK2和PDHA1的表達(dá)水平恢復(fù)(Fig. 7d)。IMP2過(guò)表達(dá)顯著促進(jìn)乳酸釋放，提高ATP含量，然而，敲低IMP2導(dǎo)致乳酸和ATP含量的釋放顯著減少，而ZFAS1可以完全逆轉(zhuǎn)IMP2的作用(Fig. 6e, f)。細(xì)胞能量代謝檢測(cè)進(jìn)一步表明，IMP2沉默降低了細(xì)胞的糖酵解能力，而ZFAS1可以逆轉(zhuǎn)IMP2沉默對(duì)這兩種類(lèi)型的CRC細(xì)胞糖酵解水平降低的影響。綜上所述，這些發(fā)現(xiàn)揭示了在CRC發(fā)生和發(fā)展的過(guò)程中，IMP2通過(guò)ola1調(diào)節(jié)ATP水解和糖酵解介導(dǎo)線粒體能量代謝促進(jìn)m6A表達(dá)。
Fig6 線粒體能量代謝受IMP2-ZFAS1-OLA1信號(hào)轉(zhuǎn)軸的影響
7 IMP2在體內(nèi)通過(guò)穩(wěn)定ZFAS1促進(jìn)細(xì)胞增殖
為確認(rèn)IMP2-ZFAS1-OLS1軸在體內(nèi)的生物學(xué)功能，將4周齡BALB/c裸鼠腋窩皮下接種4種穩(wěn)定共轉(zhuǎn)染HCT116細(xì)胞(5 × 106細(xì)胞) 建立異種移植模型，分別為shNC組、shIMP2組、shIMP2 + pcDH組、shIMP2 + ZFAS1組(Fig. 7a)。在這項(xiàng)研究中，移植后10天出現(xiàn)了一個(gè)明顯的異種移植瘤，在第40天切除異種移植瘤或隨訪至死亡(Fig. 7a)。預(yù)后評(píng)估顯示，在shIMP2和ZFAS1載體共轉(zhuǎn)染后，異種移植小鼠的生存時(shí)間顯著縮短(Fig. 7b)，提示IMP2與ZFAS1在CRC預(yù)后評(píng)估中具有協(xié)同作用。此外，轉(zhuǎn)染了shIMP2載體的異種移植小鼠的腫瘤體積、大小和重量均顯著降低，然而，與shIMP2和ZFAS1共轉(zhuǎn)染后，觀察到顯著增加(Fig. 7c–e)。結(jié)果表明，在異種移植小鼠模型中，ZFAS1過(guò)表達(dá)顯著逆轉(zhuǎn)了IMP2沉默對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的抑制作用。同樣，在第0、10和40天采集的具有代表性的異種移植物進(jìn)行研究也得到了相同的結(jié)論(Fig. 7f)。
ISH和IHC檢測(cè)證實(shí)，在異種移植瘤中，shIMP2組和shIMP2 + pcDH組的ZFAS1和OLA1表達(dá)較NC組明顯降低；而shIMP2 + ZFAS1組與NC組無(wú)顯著差異(Fig. 7g)。同樣，qPCR和WB檢測(cè)也得到相同的結(jié)論，包括在異種移植瘤中與shIMP2和ZFAS1載體共轉(zhuǎn)染后的ZFAS1和OLA1(圖7 h-j)?？傊?，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明敲低IMP2通過(guò)誘導(dǎo)m6A穩(wěn)定性，能促進(jìn) IMP2與ZFAS1/OLA1軸的相互作用，抑制異種移植物的腫瘤生長(zhǎng)。
Fig7 IMP2在體內(nèi)通過(guò)穩(wěn)定ZFAS1促進(jìn)細(xì)胞增殖
本文發(fā)現(xiàn)在CRC增殖和進(jìn)展過(guò)程中，m6A 閱讀器IMP2與長(zhǎng)鏈非編碼RNA (lncRNA) ZFAS1以m6A調(diào)節(jié)依賴(lài)的方式進(jìn)行調(diào)控，隨后增加了Obg-like ATPase 1 (OLA1)的募集以及三磷酸腺苷(ATP)水解和糖酵解。
Lu, S., et al., N6-methyladenosine reader IMP2 stabilizes the ZFAS1/OLA1 axis and activates the Warburg effect: implication in colorectal cancer. J Hematol Oncol, 2021. 14(1): p. 188.