中藥復(fù)方怎么發(fā)高分？高通量測(cè)序提分利器 Journal of Proteome Research: 蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)揭示中藥復(fù)方疏風(fēng)解毒膠囊治療急性肺損傷的分子機(jī)制
中藥復(fù)方怎么發(fā)高分？高通量測(cè)序提分利器
Journal of Proteome Research: 蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)揭示中藥復(fù)方疏風(fēng)解毒膠囊治療急性肺損傷的分子機(jī)制
在我國(guó)，中醫(yī)藥已廣泛應(yīng)用于各種疾病的治療，如板藍(lán)根和柴胡等。通常，中藥復(fù)方包括多種類型的中藥。一種或幾種草藥作為君藥發(fā)揮主要作用，其余草藥作為臣藥，輔助增強(qiáng)君藥的作用。單一中藥的成分已經(jīng)相當(dāng)復(fù)雜，更何況多種中藥配伍而成的中藥復(fù)方。長(zhǎng)久以來(lái)，盡管西方醫(yī)學(xué)非常關(guān)注中醫(yī)藥的療效，但中藥復(fù)方方面的研究成果卻很難再國(guó)際頂尖的專業(yè)期刊上發(fā)表。究其原因無(wú)非是有效成分無(wú)法確定。那么如何突破這一瓶頸呢？下面這篇文章，可能給我們一些啟發(fā)。
2017年10月，Journal of Proteome Research在線發(fā)表了中藥復(fù)方疏風(fēng)解毒膠囊治療急性肺損傷分子機(jī)制的文章“Therapeutic Mechanistic Studies of ShuFengJieDu Capsule in an Acute Lung Injury Animal Model Using Quantitative Proteomics Technology”. 下面我們來(lái)看一下這篇文章的研究思路。
首先，作者用UPLC/Q-TOF方法結(jié)合串聯(lián)MS，分析了疏風(fēng)解毒膠囊的有效成分，鑒定出96個(gè)色譜峰，對(duì)應(yīng)94種化合物。為了進(jìn)一步鑒定疏風(fēng)解毒膠囊在抗炎過(guò)程的有效成分，作者運(yùn)用NF-kB雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)，結(jié)合PharmMapper及MAS3.0，篩選出潛在的10種抗炎活性物質(zhì)及潛在的藥物作用靶點(diǎn)。然后，作者進(jìn)一步通過(guò)體內(nèi)試驗(yàn)驗(yàn)證上述靶點(diǎn)。選用SPF級(jí)別雄性SD大鼠，分成3組：空白對(duì)照組（不做任何處理），模型組（LPS誘導(dǎo)急性肺損傷(ALI)模型，并用生理鹽水處理）及治療組（LPS誘導(dǎo)ALI,并用疏風(fēng)解毒膠囊治療）。在處理的第1,3和5天，從三組中隨機(jī)選取3只大鼠，提取肺組織，進(jìn)行HE染色及蛋白質(zhì)組分析。作者應(yīng)用多維蛋白質(zhì)鑒定技術(shù)（MudPIT）和定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)（Label-free quantification）,得到了疏風(fēng)解毒膠囊治療大鼠ALI的差異表達(dá)蛋白數(shù)據(jù)。通過(guò)對(duì)差異表達(dá)蛋白進(jìn)行生物信息學(xué)分析，明確了AKT1在疏風(fēng)解毒膠囊治療大鼠ALI中的核心調(diào)控作用，并通過(guò)進(jìn)一步的分子生物學(xué)方法，驗(yàn)證了多條免疫與炎癥相關(guān)信號(hào)通路參與疏風(fēng)解毒膠囊治療ALI的調(diào)控過(guò)程。
研究路線
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下
圖一，研究流程圖
圖二，全蛋白質(zhì)組分析ALI模型肺組織經(jīng)疏風(fēng)解毒膠囊處理后的蛋白質(zhì)組變化并通過(guò)分子生物學(xué)方法驗(yàn)證
圖三，全蛋白質(zhì)組分析ALI模型巨噬細(xì)胞經(jīng)疏風(fēng)解毒膠囊處理后的蛋白質(zhì)組變化
圖四，疏風(fēng)解毒膠囊處理后巨噬細(xì)胞中重要差異蛋白的分子生物學(xué)驗(yàn)證
圖五，疏風(fēng)解毒膠囊治療ALI的分子機(jī)制預(yù)測(cè)
......