外泌體新發(fā)現(xiàn)！可抑制宮頸癌鐵死亡！

摘要
       誘導(dǎo)癌細(xì)胞鐵死亡已被提議作為幾種癌癥類型的潛在治療方法。腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAM）在促進(jìn)腫瘤惡性進(jìn)展和治療耐藥性方面起關(guān)鍵作用。然而，TAM在調(diào)節(jié)腫瘤鐵死亡中的作用和機(jī)制仍未被探索，仍然是個謎。這項研究表明，鐵死亡誘導(dǎo)劑在體外和體內(nèi)對宮頸癌顯示出治療效果。已發(fā)現(xiàn)TAM可以抑制宮頸癌細(xì)胞鐵死亡。從機(jī)制上講，包裝成外泌體的巨噬細(xì)胞衍生的miRNA-660-5p被轉(zhuǎn)運到癌細(xì)胞中。在癌細(xì)胞中，miRNA-660-5p減弱ALOX15表達(dá)以抑制鐵死亡。此外，巨噬細(xì)胞中miRNA-660-5p的上調(diào)取決于自分泌IL4/IL13激活的STAT6途徑。重要的是，在臨床宮頸癌病例中，ALOX15與巨噬細(xì)胞浸潤呈負(fù)相關(guān)，這也增加巨噬細(xì)胞降低宮頸癌中ALOX15水平的可能性。此外，單因素和多因素Cox分析均顯示ALOX15表達(dá)是獨立的預(yù)后因素，與宮頸癌的良好預(yù)后呈正相關(guān)?？傊?，這項研究揭示靶向TAM在基于鐵死亡的治療和ALOX15作為宮頸癌預(yù)后指標(biāo)中的潛在效用。本文于2023年6月發(fā)表在《Acta Pharmaceutica Sinica B》IF:14.5期刊上。
技術(shù)路線

主要實驗結(jié)果
1、腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞抑制宮頸癌鐵死亡
       為測試巨噬細(xì)胞在調(diào)節(jié)宮頸癌細(xì)胞鐵死亡方面的功能，作者測試用巨噬細(xì)胞CM處理的HeLa細(xì)胞對鐵死亡誘導(dǎo)劑erastin的敏感性，該誘導(dǎo)劑抑制胱氨酸/谷氨酸抗轉(zhuǎn)運系統(tǒng)Xc活性。如圖1A和C，通過使用PI染色的細(xì)胞死亡檢測，用來自TAM（TAMs-CM）的CM處理的HeLa和SiHa細(xì)胞相對于用單核細(xì)胞CM（Mo-CM）和M0巨噬細(xì)胞CM（M0-CM）處理的細(xì)胞對erastin具有更高的抗性。通過使用CCK-8測定來測量用TAMs-CM和三種鐵死亡誘導(dǎo)劑處理的宮頸癌細(xì)胞HeLa和SiHa的細(xì)胞活力，發(fā)現(xiàn)TAMs-CM顯著抑制厄拉斯汀，RSL3（GPX4抑制劑）和索拉非尼（系統(tǒng)Xc抑制劑）在這兩個細(xì)胞中的細(xì)胞活力降低（圖1B）。

圖1腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞抑制宮頸癌的鐵死亡

       鑒于脂質(zhì)過氧化是鐵死亡過程中的重要事件，因此作者研究TAM對erastin和RSL3產(chǎn)生脂質(zhì)ROS的影響。如圖1D和E所示，TAM顯著抑制HeLa細(xì)胞中這兩種藥物引起的脂質(zhì)ROS的爆發(fā)。在索拉非尼處理的HeLa細(xì)胞中觀察到相同的結(jié)果(圖1)。通過檢測另外兩個鐵死亡標(biāo)志物MDA和GSSG，作者進(jìn)一步驗證TAM抑制宮頸癌細(xì)胞HeLa和SiHa中的鐵死亡(圖1F)。
       先前的研究顯示TAM類似于M2型巨噬細(xì)胞。因此，作者探究M2巨噬細(xì)胞是否也能減輕宮頸癌細(xì)胞的鐵死亡。如圖1G所示，在TAMs和IL4誘導(dǎo)的M2巨噬細(xì)胞（M2）中M2巨噬細(xì)胞標(biāo)志物CD206、CD163和IL10的水平明顯升高。圖1H和I表明，由erastin和RSL3誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡被M2 CM顯著降低。此外，在HeLa和SiHa細(xì)胞中，厄拉斯汀和/或RSL3對脂質(zhì)ROS，GSSG和MDA的誘導(dǎo)顯著減弱（圖1J和K）。
       為進(jìn)一步測試TAMs對體內(nèi)宮頸癌細(xì)胞鐵死亡的影響，作者評估裸鼠HeLa細(xì)胞混合TAMs異種移植物中erastin的抗腫瘤活性。如圖1L和M所示，厄拉斯汀顯著抑制腫瘤生長，erastin的抗腫瘤作用被TAMs明顯減弱。此外，在接受erastin治療的小鼠中沒有觀察到明顯的體重?fù)p失（圖1N），這表明該藥物在體內(nèi)的毒副作用很小。
2、TAMs通過外泌體抑制宮頸癌鐵死亡
       先前的研究表明，腫瘤微環(huán)境中的微囊泡和外泌體促進(jìn)腫瘤進(jìn)展和轉(zhuǎn)移。為探究TAM分泌的外泌體是否增強(qiáng)宮頸癌對鐵死亡的抵抗力，采用超高速離心去除TAMs-CM中的外泌體，然后利用TAMs-CM聯(lián)合erastin和RSL3治療HeLa和SiHa細(xì)胞。作者推測TAMs衍生的外泌體可以預(yù)防鐵死亡。為驗證這一假設(shè)，通過離心收集TAMs-CM中的外泌體。外泌體的大小分布和形態(tài)分別采用NTA和TEM表征。如圖2A-C所示，外泌體大小異質(zhì)，TAMs-CM的平均直徑為128±25 nm，M159-CM的平均直徑為21±0 nm。通過蛋白質(zhì)印跡，作者進(jìn)一步檢測外泌體的陽性標(biāo)志物CD63和CD81，以及表征外泌體的陰性標(biāo)志物Calnexin。圖2D表示CD63和CD81在M0和TAM的外泌體中均高表達(dá)，在M0和TAM中表達(dá)低。此外，在M0和TAM的外泌體中都沒有Calnexin的表達(dá)（圖2D）。
       為評估來源于巨噬細(xì)胞的外泌體在調(diào)節(jié)宮頸癌細(xì)胞鐵死亡中的功能，分離巨噬細(xì)胞外泌體并與erastin處理的HeLa細(xì)胞共培養(yǎng)。作者發(fā)現(xiàn)，TAMs和M2巨噬細(xì)胞來源的外泌體顯著抑制erastin誘導(dǎo)的鐵死亡（圖2E）。此外，通過CCK-8測定，在用TAMs或M2巨噬細(xì)胞衍生的外泌體與erastin或RSL3或索拉非尼聯(lián)合處理的HeLa和SiHa細(xì)胞中測量細(xì)胞活力。結(jié)果表明，TAM和M2巨噬細(xì)胞來源的外泌體都明顯減弱三種鐵死亡誘導(dǎo)劑對細(xì)胞活力的降低（圖2F，G）。通過檢測脂質(zhì)ROS、MDA和GSSG，進(jìn)一步驗證TAMs來源的外泌體抑制宮頸癌癥細(xì)胞HeLa和SiHa中的鐵死亡（圖2H，I）。
       為可視化宮頸癌細(xì)胞中的外泌體攝取，從TAM中分離外泌體并用CM-DiI標(biāo)記，然后將HeLa和SiHa細(xì)胞與CM-DiI標(biāo)記的外泌體孵育不同時間。然后，通過流式細(xì)胞術(shù)檢測外泌體的內(nèi)化。如圖2J和K所示，具有CM-DiI標(biāo)記的外泌體的細(xì)胞數(shù)量以時間依賴性方式增加。通過共聚焦顯微鏡，在0和24小時觀察到內(nèi)化熒光標(biāo)記的外泌體。如圖2L和M所示，作者發(fā)現(xiàn)HeLa和SiHa細(xì)胞都可以有效地吸收外泌體。

圖2 TAM通過外泌體抑制宮頸癌鐵死亡

3、TAMs對宮頸癌鐵死亡的抑制與ALOX15的下調(diào)有關(guān)
       為探究TAMs抑制鐵死亡的分子機(jī)制，作者通過RT-PCR檢測鐵死亡相關(guān)基因的mRNA水平，包括NCOA4，BECN1，F(xiàn)TH1，ALOX12，ALOX15，NRF2，F(xiàn)SP1，SCD1，TFRC，LPCAT3，HMGCR，CBS，ATP5G3，CS，P53，ACSL4，GPX4，SLC7A11和LSH。如圖3A所示，通過與M0-CM相比，作者發(fā)現(xiàn)TAMs-CM顯著降低HeLa和SiHa細(xì)胞中的ALOX15 mRNA水平并略微增加GPX4 mRNA水平。為同時將TAMs-CM改變的基因水平上的倍數(shù)變化與全局水平的統(tǒng)計學(xué)意義相關(guān)聯(lián)，以log2倍變化為x軸，log10（P值）為y軸。如圖3B和C所示，火山圖顯示TAMs-CM處理組相對于HeLa和SiHa細(xì)胞中M0-CM組的基因表達(dá)差異。紅點代表選定的ALOX15基因。這些結(jié)果表明，ALOX15是兩個宮頸癌細(xì)胞中TAMs-CM最顯著的下調(diào)基因。為進(jìn)一步確認(rèn)TAMs-CM降低的ALOX15的表達(dá)，用PBMC和THP-1衍生的TAM或M2巨噬細(xì)胞的條件培養(yǎng)基或純化外泌體處理HeLa細(xì)胞。然后，分別通過RT-qPCR和蛋白質(zhì)印跡檢測ALOX15 mRNA和蛋白質(zhì)水平。如圖3D-F所示，ALOX15的mRNA和蛋白質(zhì)水平因條件培養(yǎng)基或TAM或M2巨噬細(xì)胞來源的外泌體而顯著降低。在用TAM-CM處理的HeLa細(xì)胞中檢測到幾種重要的鐵死亡調(diào)節(jié)因子FSP1，ACSL4，DHODH和GPX4蛋白表達(dá)。
       此外，作者在異種移植腫瘤組織中檢測到ALOX15的表達(dá)。如圖3G所示，ALOX15在混合TAMs異種移植細(xì)胞腫瘤組織中的表達(dá)比HeLa細(xì)胞異種移植物單獨存在時顯著降低。為檢測ALOX15下調(diào)與鐵死亡抑制相關(guān)，兩個宮頸癌細(xì)胞中ALOX15的表達(dá)被siRNA敲低，然后用erastin處理細(xì)胞。如圖3H和I所示，敲低ALOX15顯著減少erastin誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡。為進(jìn)一步證明ALOX15參與TAMs抑制的宮頸癌細(xì)胞鐵死亡，ALOX15被TAMs處理的癌細(xì)胞中的siRNA耗盡，然后研究erastin誘導(dǎo)的鐵死亡。如圖3J和K所示，當(dāng)ALOX15敲除時，TAM不能顯著減弱宮頸癌鐵死亡。

圖3 TAM對宮頸癌癥鐵死亡的抑制與ALOX15的下調(diào)有關(guān)。

4、TAMs來源的外泌體miR-660-5p減弱ALOX15表達(dá)以抑制宮頸癌細(xì)胞中的鐵死亡
       研究表明巨噬細(xì)胞釋放外泌體以將microRNA穿梭到腫瘤微環(huán)境中的相鄰癌細(xì)胞中。據(jù)報道，42個microRNA在M2巨噬細(xì)胞來源外泌體中顯著上調(diào)，PBMC來源的M2巨噬細(xì)胞中有667個microRNA顯著增加。作者從這兩項研究中獲取microRNA的交集，發(fā)現(xiàn)10種常見的microRNA（圖4A，B）。接下來，作者將這10個microRNA模擬物轉(zhuǎn)染到HeLa細(xì)胞中并檢測ALOX15表達(dá)。如圖4C所示，ALOX15水平被miR-936和miR-660-5p降低。MiR-660-5p對ALOX15表達(dá)的抑制作用最顯著。此外，miR-660-5p在TAMs和M2巨噬細(xì)胞中的表達(dá)明顯高于單核細(xì)胞（Mo）和M0巨噬細(xì)胞，以及HeLa和SiHa細(xì)胞（圖4D）。在TAM、Mo、M0和M2巨噬細(xì)胞的外泌體中也檢測到miR-660-5p水平。如圖4D所示，相對于Mo和M0巨噬細(xì)胞，TAMs和M2巨噬細(xì)胞衍生的外泌體中miR-660-5p水平顯著增加。
       為研究miR-660-5p在介導(dǎo)TAMs抑制宮頸癌癥細(xì)胞ALOX15表達(dá)中的作用，用miR-660-5p抑制劑轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞，然后用M0巨噬細(xì)胞和TAMs的CM和外泌體處理。通過RT-qPCR和蛋白印跡分別檢測ALOX15的mRNA和蛋白水平。圖4E和F表明，相對于對照M0巨噬細(xì)胞，ALOX15的表達(dá)被TAMs的CM或外泌體顯著抑制，而miR-660-5p抑制劑明顯逆轉(zhuǎn)CM或TAMs來源外泌體對ALOX15表達(dá)的減少。
       由于microRNA主要通過與基因的mRNA結(jié)合來減弱基因表達(dá)，因此作者探究miR-660-5p是否與ALOX15基因的mRNA結(jié)合。利用在線miRNA靶生物信息學(xué)預(yù)測數(shù)據(jù)庫miRWalk預(yù)測ALOX660編碼序列（CDS）中保守的miR-660-5p靶位點（圖4G）。為進(jìn)一步確認(rèn)miR-660-5p對ALOX6605的靶向，進(jìn)行熒光素酶活性測定。將ALOX15的野生型（WT）或突變型（MT）CDS克隆到pGL3熒光素酶報告載體中螢火蟲熒光素酶編碼區(qū)的下游。載體與miR-660-5p模擬物或抑制劑共轉(zhuǎn)染到HeLa細(xì)胞中。正如預(yù)期的那樣，作者發(fā)現(xiàn)miR-660-5p模擬物急劇降低熒光素酶活性，而miR-660-5p抑制劑顯著增加熒光素酶活性（圖4H）。此外，在轉(zhuǎn)染MT報告載體的HeLa細(xì)胞中，miR-660-5p模擬物和抑制劑對熒光素酶活性沒有明顯變化（圖4H）。在HeLa和SiHa細(xì)胞中，作者也顯示出模擬物和抑制劑可以明顯降低和誘導(dǎo)ALOX15 mRNA表達(dá)（圖4I）。用熒光素酶報告載體轉(zhuǎn)染的HeLa細(xì)胞與ALOX15的WT或MT CDS進(jìn)一步用TAM-和M2巨噬細(xì)胞-CM處理，然后檢測熒光素酶活性。圖4J表明TAMs和M2巨噬細(xì)胞-CM 顯著下調(diào)WT CDS轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞報告載體中的熒光素酶活性，但不下調(diào)MT CDS。
       為研究miR-660-5p在TAMs抑制的鐵死亡中的作用，用miR-660-5p抑制劑轉(zhuǎn)染HeLa和SiHa細(xì)胞，并與TAM的CM和外泌體一起孵育。然后用erastin和RSL3處理這些細(xì)胞。通過檢測細(xì)胞死亡，作者發(fā)現(xiàn)CM和外泌體對細(xì)胞死亡的減少被miR-660-5p抑制劑完全阻斷（圖4K和L）。這一結(jié)果表明，宮頸癌細(xì)胞中內(nèi)源性miRNA-660-5p的表達(dá)太低，無法影響細(xì)胞鐵死亡反應(yīng)。
       此外，采用腫瘤異種移植裸鼠模型評估m(xù)iR-660-5p在介導(dǎo)TAMs誘導(dǎo)的宮頸癌體內(nèi)鐵死亡抵抗中的作用。如圖4M，在厄拉斯汀治療后，異種移植腫瘤與miR-660-5p抑制劑高表達(dá)HeLa細(xì)胞和TAMs聯(lián)合生長比TAMs和對照HeLa的腫瘤生長更快，更大。然而，在那些單獨使用HeLa的腫瘤中，miR-660-5p抑制劑未能改變腫瘤對erastin的敏感性。
       為直接觀察TAMs衍生的miRNA進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，將HeLa和SiHa細(xì)胞與在宮頸癌細(xì)胞中轉(zhuǎn)染FAM標(biāo)記的miR-660-5p模擬物的TAM共培養(yǎng)（圖4P），并通過熒光顯微鏡觀察。圖4N顯示HeLa和SiHa細(xì)胞中都存在FAM熒光。此外，流式細(xì)胞術(shù)分析顯示，用FAM標(biāo)記的microRNA轉(zhuǎn)染的兩個癌細(xì)胞（圖4O).

圖4 TAMs來源的外體miR-660-5p減弱ALOX15的表達(dá)，以抑制宮頸癌細(xì)胞鐵死亡

5、IL4/IL13通過激活STAT660途徑誘導(dǎo)miR-5-6p表達(dá)
       作者發(fā)現(xiàn)miR-660-5p在TAM和M2巨噬細(xì)胞中均過表達(dá)。據(jù)報道，TAM的許多特性也是M2巨噬細(xì)胞的特征。幾種細(xì)胞因子在兩種細(xì)胞中均有表達(dá)，如IL6、IL10、IL4、IL13和TGF-β。因此，作者想知道這些因素的表達(dá)是否與miR-660-5p有關(guān)。通過RT-qPCR測定，作者發(fā)現(xiàn)在TAMs中，IL4和IL13以劑量依賴的方式增加miR-660-5p的水平（圖5A），而IL6，IL10和TGF-β不影響miR-660-5p水平（圖5B和C）。先前的研究表明，STAT3和STAT6激活是IL4和IL13的原因。因此，作者假設(shè)TAM中IL3和IL6激活的STAT4和STAT13與miR-660-5p表達(dá)相關(guān)。通過抑制TAM中STAT3和STAT6的活化，作者發(fā)現(xiàn)IL660和IL5對miR-4-13p的誘導(dǎo)被STAT6抑制劑而不是STAT3抑制劑顯著減弱（圖5D和F）。蛋白質(zhì)印跡結(jié)果顯示，兩種抑制劑分別顯著降低p-STAT6和p-STAT3（即活化的STAT6和STAT3）（圖5E和G）。圖5H還表明IL4和IL13均顯著增加TAMs外泌體中的miR-660-5p水平，而IL660和IL5誘導(dǎo)的miR-4-13p水平明顯減弱。通過檢測巨噬細(xì)胞中的miR-660-5p和p-STAT6表達(dá)，作者發(fā)現(xiàn)miR-660-5p和p-STAT6在TAMs和M2巨噬細(xì)胞中的水平明顯高于M0巨噬細(xì)胞（圖5I-L）。為研究STAT660抑制劑對miR-5-6p表達(dá)的抑制是否減弱TAM誘導(dǎo)的鐵死亡抵抗力，將帶有Hela混合TAM的異種移植腫瘤與STAT6抑制劑和erastin聯(lián)合治療。如圖5M所示，STAT6抑制劑顯著減弱TAM誘導(dǎo)的對erastin的耐藥性。然而，在單獨使用Hela的異種移植腫瘤中，作者發(fā)現(xiàn)STAT6抑制劑還增強(qiáng)erastin（圖5N）。在兩種腫瘤模型中，單獨使用STAT6抑制劑發(fā)揮一定的抗腫瘤作用（圖5M和N）。這表明STAT6抑制劑增強(qiáng)erastin-抗腫瘤作用可能參與TAM中miR-660-5p表達(dá)的抑制和腫瘤細(xì)胞中STAT6活性的抑制。此外，注射erastin和STAT6抑制劑的小鼠體重沒有顯著變化（圖5O和P）。

圖5 IL4/IL13通過激活STAT6途徑誘導(dǎo)miR-660-5p表達(dá)

6、ALOX15與巨噬細(xì)胞浸潤呈負(fù)相關(guān)，與良好預(yù)后呈正相關(guān)
       為進(jìn)一步證實TAMs抑制宮頸癌中的ALOX15表達(dá)，分析TCGA中高表達(dá)與低表達(dá)ALOX15宮頸癌組織中免疫細(xì)胞群的豐度。圖6A顯示高表達(dá)ALOX15宮頸癌組織中巨噬細(xì)胞豐度顯著降低。此外，作者通過熱圖來可視化28個浸潤免疫細(xì)胞群（圖6B）。結(jié)果表明，與高表達(dá)的ALOX15組織相比，低表達(dá)ALOX15宮頸癌組織中巨噬細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)化ssGSEA評分顯著更高。上述結(jié)果提出浸潤TAMs抑制宮頸癌細(xì)胞ALOX15表達(dá)的可能性。
       此外，ALOX15表達(dá)與TCGA中宮頸癌癥OS和無病生存率呈正相關(guān)（圖6C和D）。此外，鄭州大學(xué)進(jìn)一步分析ALOX15表達(dá)與宮頸癌預(yù)后的關(guān)系。通過使用IHC染色，研究ALOX15在147個石蠟包埋的存檔宮頸癌組織中的表達(dá)。組織包括53個Ib1期，28個Ib2期，31個IIa1期和35個IIa2期腫瘤。在147個樣品中，在82個樣品中檢測到ALOX15蛋白的高表達(dá)，在其余65個樣品中觀察到ALOX15的低水平（表1和圖6E）?；颊呱媛史治鲲@示，宮頸癌癥患者的ALOX15表達(dá)與OS之間存在明顯的正相關(guān)性（圖6F）。

圖6 ALOX15與巨噬細(xì)胞浸潤和良好預(yù)后有關(guān)

       根據(jù)宮頸癌患者IHC評分，分析ALOX15水平與臨床病理特征的相關(guān)性。如表1，高ALOX15表達(dá)與腫瘤大小、復(fù)發(fā)率和5年內(nèi)生命狀態(tài)呈顯著負(fù)相關(guān)。然而，其他不良的臨床病理特征，如年齡和FIGO分期，與ALOX15表達(dá)沒有顯著相關(guān)性。為驗證ALOX15表達(dá)與宮頸癌預(yù)后之間的關(guān)系，作者進(jìn)行單變量和多變量Cox分析。單因素分析顯示，腫瘤大小、淋巴血管間隙受累、T分類、盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和ALOX15表達(dá)是OS的預(yù)后因素（表2）。多因素分析顯示，淋巴血管間隙受累、T分類和ALOX15表達(dá)是獨立的預(yù)后因素（表2）。
       最后，該研究提供一個TAM增強(qiáng)宮頸癌對鐵死亡抗性的示意圖（圖7）。

表1 ALOX15表達(dá)與宮頸癌臨床病理特征的相關(guān)性

表2 癌癥臨床病理特征與總生存率相關(guān)的單變量多變量Cox回歸分析

圖7 TAM增強(qiáng)癌癥對鐵死亡抗性的示意圖。一個說明TAM來源的外泌體miR-660-5p在調(diào)節(jié)ALOX15誘導(dǎo)的宮頸癌癥細(xì)胞鐵死亡中作用的假說模型。

       總之，該研究表明TAMs通過分泌外泌體傳遞特殊信號分子來抑制宮頸癌細(xì)胞鐵死亡的新功能。研究還為TME抑制的癌細(xì)胞死亡機(jī)制提供新的見解。此外，STAT6抑制劑增強(qiáng)鐵死亡誘導(dǎo)劑的抗腫瘤作用，表明STAT6抑制劑與鐵死亡誘導(dǎo)劑的聯(lián)合應(yīng)用可能是宮頸癌新的有前景的治療方法。同時發(fā)現(xiàn)ALOX15表達(dá)與患者總生存期和無病生存期呈顯著負(fù)相關(guān)，表明ALOX15可能是宮頸癌的預(yù)后標(biāo)志物。

實驗方法
細(xì)胞活力和細(xì)胞死亡測定，脂質(zhì)ROS分析，丙二醛（MDA）和谷胱甘肽的測定，RNA干擾，雙熒光素酶活性測定，RT-qPCR，WB，免疫熒光，外泌體純化和標(biāo)記，小鼠異種移植宮頸癌模型，透射電子顯微鏡（TEM）測定，免疫組織化學(xué)（IHC）分析
參考文獻(xiàn)
Luo Y, Chen Y, Jin H, et al. The suppression of cervical cancer ferroptosis by macrophages: The attenuation of ALOX15 in cancer cells by macrophages-derived exosomes. Acta Pharm Sin B. 2023; 13(6): 2645-2662. doi:10.1016/j.apsb.2023.03.025