小膠質(zhì)細胞促進(jìn)抗腫瘤免疫并抑制乳腺癌腦轉移

欄目:最新研究動(dòng)態(tài) 發(fā)布時(shí)間:2024-06-13
乳腺癌腦轉移(BCBM)是一種致命的疾病,沒(méi)有有效的治療方法......

 

摘要

       乳腺癌腦轉移(BCBM)是一種致命的疾病,沒(méi)有有效的治療方法。先前的研究表明,腦癌和轉移瘤密集地浸潤著(zhù)抗炎、促腫瘤的腫瘤相關(guān)巨噬細胞,但大腦駐留小膠質(zhì)細胞的作用仍然存在爭議,因為它們很難與其他腫瘤相關(guān)巨噬細胞區分開(kāi)來(lái)。利用單細胞 RNA 測序、遺傳和人源化小鼠模型,我們專(zhuān)門(mén)鑒定了小膠質(zhì)細胞,并發(fā)現它們在 BCBM 中發(fā)揮著(zhù)獨特的促炎癥和腫瘤抑制作用。缺乏小膠質(zhì)細胞的動(dòng)物表現出轉移增加、存活率降低以及自然殺傷細胞和 T 細胞反應減少,這表明小膠質(zhì)細胞對于促進(jìn)抗腫瘤免疫以抑制 BCBM 至關(guān)重要。我們發(fā)現促炎癥反應在人類(lèi)小膠質(zhì)細胞中是保守的,并且其反應標志物與 BCBM 患者更好的預后相關(guān)。這些發(fā)現確立了小膠質(zhì)細胞在抗腫瘤免疫中的重要作用,并強調它們作為腦轉移的潛在免疫治療靶點(diǎn)。

       該研究于2023年11月發(fā)表在《Nature cell biology》,IF:21.3。

技術(shù)路線(xiàn)

 

 

 

結果

1、BCBM 中 TAMs 的單細胞分析

       我們使用 scRNA-seq 通過(guò) MDA-MB-231-BR (231BR) 模型來(lái)測試小膠質(zhì)細胞對 BCBM 的反應。在此模型中,綠色熒光蛋白(GFP)標記的231BR細胞通過(guò)心內注射遞送至動(dòng)脈循環(huán),并在第28天形成實(shí)質(zhì)腦轉移(圖1a,b)。與人類(lèi) BCBM 一樣,轉移灶被離子化鈣結合接頭分子 1 (IBA1+) TAMs 高度浸潤(圖 1b、c)。對于 scRNA-seq,從對照和腦轉移分離細胞,并通過(guò)流式細胞術(shù)分離髓系細胞(圖 1d)。將癌細胞和星形膠質(zhì)細胞作為對照(圖 1d)。對通過(guò)質(zhì)量控制過(guò)濾的 42,891 個(gè)細胞的分析揭示了由經(jīng)典的marker識別的七種不同的細胞類(lèi)型(圖 1e、f)。這包括目標細胞類(lèi)型:星形膠質(zhì)細胞(Aldoc 和 Atp1a2)、小膠質(zhì)細胞(Tmem119 和 P2ry12)和非小膠質(zhì)細胞髓系細胞(Lyz2 和 Plac8)(圖 1e、f)。我們還回收了少量室管膜細胞(Ccdc153和Rarres2)、少突膠質(zhì)細胞(Mbp和Ptgds)、血管細胞(Cldn5和Vtn)和淋巴細胞(Cd3g和Gzma)(圖1e、f)。淋巴細胞和非小膠質(zhì)髓系細胞群優(yōu)先來(lái)自轉移狀態(tài),表明這些細胞是從外周招募的。我們發(fā)現對照和腦轉移的星形膠質(zhì)細胞聚類(lèi)差異有限。

 

 

圖1| BCBM 中 TAMs 的單細胞分析。

 

2、小膠質(zhì)細胞對 BCBM 表現出強烈的促炎癥反應

       與星形膠質(zhì)細胞相反,對髓系細胞的分析揭示了對照和轉移條件的強烈分離(圖2a)。通過(guò)由 Bowman 等人 (2016) 開(kāi)發(fā)的特征,對每個(gè)細胞的核心小膠質(zhì)細胞特征進(jìn)行評分,將小膠質(zhì)細胞與其他髓系細胞群區分開(kāi)來(lái)(圖 2b)。這確定了兩個(gè)大的小膠質(zhì)細胞群體(Tmem119、P2ry12、Sparc 和 Gpr34),其中一個(gè)包含來(lái)自對照和腦轉移的小膠質(zhì)細胞,另一個(gè)幾乎完全來(lái)自腦轉移(圖 2a、b)。我們還發(fā)現了兩個(gè)小膠質(zhì)細胞群體,它們的應激反應增加,這是組織操作后常見(jiàn)的。還鑒定出中性粒細胞(Camp 和 S100a9)、單核細胞/巨噬細胞(Ly6c2 和 Lyz2)、成熟樹(shù)突細胞(Ccr7 和 Flt3)和 B 細胞(Igkc 和 Cd79a)(圖 2b)。

       對小膠質(zhì)細胞的進(jìn)一步分析揭示了 BCBM 的劇烈變化。我們鑒定了對照和腦轉移小膠質(zhì)細胞之間差異表達的 3,715 個(gè)基因?;虮倔w論 (GO) 分析表明,最上調的途徑與促炎癥反應相關(guān),例如“細胞因子產(chǎn)生”、“抗原加工和呈遞”和“對 IFN-β 的反應”(圖 2c)。進(jìn)一步的分析表明,并非所有小膠質(zhì)細胞都一致上調這些程序。我們使用了一種稱(chēng)為潛在狄利克雷分配(LDA)的概率聚類(lèi)方法,也稱(chēng)為主題建模,來(lái)評估小膠質(zhì)細胞異質(zhì)性(圖2d)。與標準細胞聚類(lèi)方法不同,主題建模將每個(gè)細胞分配給多個(gè)基因模塊或主題,這可以更好地了解不同但重疊的基因模塊在細胞群體中的表達方式。該分析確定了四個(gè)核心主題。主題 12 是最廣泛上調的,代表干擾素 (IFN) 反應程序(Bst2、Ifitm3、Ifit3b 和 Isg15),此前已在其他疾病背景下小膠質(zhì)細胞報道過(guò)該程序(圖 2e-g)。這可能代表了小膠質(zhì)細胞對轉移性浸潤和組織損傷的最初感知。主題 15 顯示出更受限的表達模式,并且富含與抗原呈遞 (AP) 相關(guān)的基因(Cd74、H2-Aa 和 H2-D1)(圖 2e-g),這也在神經(jīng)膠質(zhì)瘤和阿爾茨海默病中觀(guān)察到。 AP 基因使 AP 能夠作用于 T 細胞,這就提出了小膠質(zhì)細胞是否向中樞神經(jīng)系統中的 T 細胞呈遞抗原的問(wèn)題。主題 14 由一小部分小膠質(zhì)細胞表達,并與分泌表型相關(guān)(圖 2e-g)。該主題富集了與外泌體(Cd63)、脂質(zhì)代謝(Apoe 和 Lpl)和細胞因子(Spp1、Csf1、Il1b 和 Tnf)相關(guān)的基因(圖 2e,g)。這個(gè)主題與疾病相關(guān)小膠質(zhì)細胞或“DAM”的特征強烈重疊,“DAM”是在神經(jīng)退行性變中發(fā)現的一群吞噬細胞小膠質(zhì)細胞。 IFN 反應和 AP 主題均包括編碼多種免疫細胞運輸趨化因子的基因(圖 2e、g)。最后一個(gè)主題(主題 3)富含核糖體基因,這可能表明細胞的轉錄能力或應激反應增加。這些數據表明,小膠質(zhì)細胞上調多種促炎癥程序,表明它們在 BCBM 的免疫反應中發(fā)揮著(zhù)不同的作用。

 

 

圖2|小膠質(zhì)細胞對 BCBM 表現出強烈的促炎癥反應

 

3、小膠質(zhì)細胞反應在不同的 BCBM 模型中是保守的

       我們通過(guò)流式細胞術(shù)、原位免疫熒光(IF)和細胞因子陣列在蛋白質(zhì)水平驗證了小膠質(zhì)細胞促炎癥反應。我們通過(guò)流式細胞術(shù)評估了三個(gè)關(guān)鍵標志物:骨髓基質(zhì)抗原 2 (BST2)、主要組織相容性復合物 II (MHC-II) 和 CD74 。我們發(fā)現每個(gè)標記的表達增加在五種不同的 BCBM 模型中是保守的(圖 3a),顯示小膠質(zhì)細胞對轉移的保守性。

       我們使用多重 IF 系統(索引聯(lián)合檢測,CODEX)進(jìn)行原位驗證。我們對 MHC-II、CD74 和 IFN 刺激基因 15 (ISG15) 以及 TMEM119 和 GFP 進(jìn)行共染色,以分別識別小膠質(zhì)細胞和腫瘤細胞。我們發(fā)現促炎性小膠質(zhì)細胞位于腫瘤細胞的近端,而遠端小膠質(zhì)細胞呈陰性(圖3b,c)。小膠質(zhì)細胞共表達所有三種標記的頻率最高(MHC-II+ CD74+ ISG15+,29%)(圖3c)。我們還觀(guān)察到僅表達 AP 標記物(MHC-II+ CD74+ ISG15?,11%)或 IFN 反應標記物(MHC-II? CD74? ISG15+,11%)的小膠質(zhì)細胞亞群(圖 3c)。這些數據與我們的主題模型一致,顯示出明顯的標記重疊,但 AP 和 IFN 反應程序對小膠質(zhì)細胞的不同子集具有顯著(zhù)的排他性。

       我們使用細胞因子陣列研究了小膠質(zhì)細胞的促炎功能。與我們的 scRNA-seq 一致,我們發(fā)現來(lái)自腫瘤大腦的小膠質(zhì)細胞上調多種促炎細胞因子,包括巨噬細胞集落刺激因子 (CSF1)、趨化因子配體 5 (CCL5)、趨化因子配體 9 (CXCL9) 和趨化因子配體 10 (CXCL10)(圖3d)??偠灾?,這些數據在蛋白質(zhì)水平上驗證了我們的 scRNA-seq 結果,并證明小膠質(zhì)細胞對 BCBM 表現出促炎癥反應。

 

 

圖3|小膠質(zhì)細胞促炎癥反應在不同的 BCBM 模型中是保守的

 

4、缺乏小膠質(zhì)細胞的動(dòng)物顯示腫瘤進(jìn)展加快

       先前的工作確定了 TAMs 在腦癌和轉移中的促腫瘤作用。這些研究主要利用 CSF1R 抑制劑和針對小膠質(zhì)細胞和其他類(lèi)型 TAMs1 的 CX3CR1 靶向基因消融策略。最近開(kāi)發(fā)了一種遺傳模型,由于 Csf1r 基因座中稱(chēng)為 fms 內含子調節元件 (FIRE) 的關(guān)鍵超級增強子的缺失,該模型特別缺乏小膠質(zhì)細胞(圖 4a)。Csf1rΔFIRE/ΔFIRE(FIRE-敲除(KO))模型缺乏小膠質(zhì)細胞,同時(shí)保留了大多數大腦駐留巨噬細胞和骨髓來(lái)源的髓系細胞,我們通過(guò)流式細胞術(shù)證實(shí)了這一點(diǎn)(圖 4b)。我們通過(guò)比較 FIRE 野生型 (WT) 和 FIRE-KO 動(dòng)物的腫瘤進(jìn)展,研究了小膠質(zhì)細胞在 BCBM 中的作用。給小鼠注射 GFP 和熒光素酶標記的 EO771 細胞,并通過(guò)體內生物發(fā)光 (IVIS) 進(jìn)行監測(圖 4c)。令人驚訝的是,許多 FIRE-KO 小鼠很快出現了晚期疾病的明顯臨床癥狀(圖 4d,e)。 14 只 FIRE-KO 小鼠中有 5 只在終點(diǎn)前死亡(死亡率為 36%),而所有 19 只 FIRE-WT 小鼠均存活(死亡率為 0%)(圖 4d)。與 FIRE-WT 相比,存活的 FIRE-KO 小鼠的體重也減少了 20% 以上,表明發(fā)病率增加(圖 4e)。 IVIS 成像揭示了腫瘤生長(cháng)動(dòng)力學(xué)隨時(shí)間的變化。我們在 19 只 FIRE-WT 小鼠中的 8 只中觀(guān)察到腫瘤抑制,而所有 14 只 FIRE-KO 動(dòng)物中的信號持續增加(圖 4f)。我們使用連續稀釋方法進(jìn)一步比較了 FIRE-KO 和 FIRE-WT 小鼠的腫瘤移植情況。這表明與 FIRE-WT 小鼠相比,FIRE-KO 小鼠的移植效率更高,腫瘤生長(cháng)更大??傊?,這些數據表明,缺乏小膠質(zhì)細胞的動(dòng)物表現出腫瘤生長(cháng)和植入增加,以及腫瘤抑制能力下降。

 

 

圖4|缺乏小膠質(zhì)細胞的動(dòng)物表現出腫瘤抑制能力降低

 

5、小膠質(zhì)細胞促進(jìn) NK 和 T 細胞對 BCBM 的反應

       鑒于我們在 FIRE-KO 小鼠中觀(guān)察到腫瘤抑制減少,我們假設小膠質(zhì)細胞通過(guò) T 細胞促進(jìn)腫瘤抑制。我們通過(guò)確定 FIRE-KO 小鼠是否表現出對 BCBM 的 T 細胞反應減弱來(lái)檢驗這一假設。我們將 EO771 細胞注射到 FIRE-WT 和 FIRE-KO 動(dòng)物中,并在第 7 天開(kāi)始觀(guān)察腫瘤抑制時(shí)通過(guò)流式細胞術(shù)比較大腦中 NK、T 和骨髓細胞群的數量和頻率(圖 5a)。盡管離體分析顯示此時(shí)腫瘤大小沒(méi)有顯著(zhù)差異,但 FIRE-KO 小鼠所有 T 細胞亞群的數量和頻率均減少,包括 CD4+、CD8+ 和 T 調節性 (Treg) 細胞(圖 5b,c)。 FIRE-KO 動(dòng)物中 NK 和 NKT 細胞幾乎完全不存在(圖 5b、c)。功能標記物分析顯示 FIRE-KO 中 CD8+ 和 CD4+ 效應器以及中央記憶 T 細胞的數量持續減少。我們還發(fā)現 FIRE-KO 中脫粒 CD107a+ NK 和 CD8+ 細胞的數量顯著(zhù)減少(圖 5d)。 CD11b+ Ly6c+ 單核細胞的分析顯示 FIRE-WT 和 FIRE-KO 之間的數量沒(méi)有顯著(zhù)差異。進(jìn)一步分析表明,FIRE-WT 中 CD8+ T 細胞頻率與 Tregs 呈負相關(guān),但在 FIRE-KO 中呈正相關(guān)。這意味著(zhù),在 FIRE-WT 中,具有較多 CD8+ T 細胞的小鼠具有較少的 Tregs,而在 FIRE-KO 中,具有較多 CD8+ T 細胞的小鼠也具有較多的 Tregs。因此,在沒(méi)有小膠質(zhì)細胞的情況下,CD8+ T 細胞誘導腫瘤抑制的效果可能較差,因為存在相對較多的免疫抑制性 Tregs??傊?,這些數據表明小膠質(zhì)細胞通過(guò)支持 NK、NKT 和 T 細胞對 BCBM 的反應來(lái)促進(jìn)抗腫瘤免疫微環(huán)境。

 

 

圖5|小膠質(zhì)細胞促進(jìn) NK 和 T 細胞對 BCBM 的反應

 

6、小膠質(zhì)細胞和 T 細胞協(xié)調抗腫瘤反應

       我們通過(guò)評估缺乏 T 細胞的 FIRE-WT 動(dòng)物的腫瘤生長(cháng),進(jìn)一步研究了小膠質(zhì)細胞的腫瘤抑制作用是否是通過(guò) T 細胞介導的。我們使用兩種方法來(lái)靶向T細胞,用S1P抑制劑(FTY720)治療(阻止T細胞運輸到CNS),以及缺乏T細胞的RAG1-KO小鼠(圖6a)。首先在第 0 天給動(dòng)物注射 EO771 細胞。從第 0 天開(kāi)始每天注射 FTY720 和載體,直到第 12 天結束。流式細胞術(shù)分析證實(shí)使用這兩種方法都可以消除大腦中的 T 細胞(圖 6b)。小膠質(zhì)細胞和單核細胞的頻率在各組之間沒(méi)有顯著(zhù)差異。在FTY720和RAG1-KO組中,我們發(fā)現相對于對照動(dòng)物,腫瘤植入和腫瘤負荷增加(圖6c、d)。這表明,在沒(méi)有 T 細胞的情況下,充滿(mǎn)小膠質(zhì)細胞的動(dòng)物抑制 BCBM 的能力較差,這表明小膠質(zhì)細胞至少部分通過(guò)支持 T 細胞反應來(lái)抑制 BCBM。

       我們還發(fā)現 WT 和 T 細胞缺陷動(dòng)物之間小膠質(zhì)細胞標記物表達存在有趣的差異。 FTY720 處理小鼠的小膠質(zhì)細胞顯示 AP 標記物 MHC-II+ 和 CD74+ 的百分比分別降低了 3.1 倍和 1.6 倍(圖 6e)。這些蛋白質(zhì)的表達減少在 RAG1-KO 小鼠中更為明顯(圖 6e),表明這不僅僅是 FTY720 治療的效果。此外,FTY720處理的小鼠和RAG1-KO小鼠的IFN反應蛋白BST2陽(yáng)性小膠質(zhì)細胞的百分比分別是2倍和9.4倍(圖6e)。這表明T細胞可能需要完全許可小膠質(zhì)細胞上調 AP 程序,如果沒(méi)有 T 細胞,小膠質(zhì)細胞僅限于 IFN 反應程序。

 

 

圖6|小膠質(zhì)細胞和 T 細胞協(xié)調抗腫瘤反應

 

7、缺乏 T 細胞的動(dòng)物中小膠質(zhì)細胞活化的改變

       我們使用 scRNA-seq 來(lái)確定 AP 程序的小膠質(zhì)細胞上調是否依賴(lài)于 T 細胞浸潤。我們將 EO771 細胞移植到 C57BL/6 和 RAG1-KO 小鼠中,并在第 4 天和第 10 天這兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)評估分選的免疫細胞中的基因表達(圖 7a)。聚類(lèi)和標記基因分析確定了九種主要免疫細胞類(lèi)型(圖 7b)。亞群分析顯示,從第 4 天到第 10 天,T 細胞的頻率增加了 2 倍以上,表明隨著(zhù)腫瘤進(jìn)展,T 細胞浸潤增加。 RAG1-KO 小鼠中未檢測到 T 細胞。我們還發(fā)現 T 細胞多樣性從第 4 天到第 10 天劇烈擴展。最值得注意的是naive T 細胞的減少以及增殖和 CD8 效應 T 細胞的增加,表明大腦中激活 T 細胞的相對頻率隨著(zhù)時(shí)間的推移而增加。

       我們對小膠質(zhì)細胞進(jìn)行了亞群分析,以確定它們的基因表達如何隨著(zhù)時(shí)間的推移與 T 細胞激活并行變化(圖 7b)。小膠質(zhì)細胞的亞聚類(lèi)顯示出與我們之前確定的相似的群體(圖7b)。我們對數據集中每個(gè)小膠質(zhì)細胞的與每個(gè)主題相關(guān)的 top 基因的表達、IFN 反應、分泌和 AP 進(jìn)行評分(圖 7c)。這表明,在 C57BL/6 動(dòng)物中,從第 4 天到第 10 天,所有三個(gè)程序都隨著(zhù)時(shí)間的推移而增加。在第4天,我們觀(guān)察到分泌程序的平均得分最高,AP程序的平均得分最低,這表明在早期時(shí)間點(diǎn),比AP程序更多的小膠質(zhì)細胞表達分泌(圖7c)。我們發(fā)現缺乏 T 細胞的 RAG1-KO 小鼠的小膠質(zhì)細胞中 AP 程序僅限于不表達(圖 7c-f)。相反,我們發(fā)現 C57BL/6 和 RAG1-KO 小鼠中分泌和 IFN 反應程序的表達相似,表明 AP 而不是分泌和 IFN 反應程序依賴(lài)于淋巴細胞。每個(gè)程序的 top 標志物顯示出相似的模式,其中大量小膠質(zhì)細胞在第4天表達CD63(分泌)和BST2(IFN反應),但有限的小膠質(zhì)細胞表達CD74(AP)(圖7d-f)。偽時(shí)間分析(Monocle)表明,小膠質(zhì)細胞遵循從穩態(tài)到分泌和干擾素反應的過(guò)程,最終以 AP 和循環(huán)簇結束(圖 7g)。這些數據支持這樣一種模型:小膠質(zhì)細胞最初上調分泌和干擾素反應程序以響應大腦中癌細胞的出現,隨后在淋巴細胞浸潤后上調 AP 基因。這可能有助于維持大腦局部 T 細胞的激活,并解釋為什么小膠質(zhì)細胞損失會(huì )導致 T 細胞反應減弱。值得注意的是,我們還觀(guān)察到免疫抑制細胞(Treg 和單核細胞)在稍后時(shí)間點(diǎn)的擴增,這可能會(huì )抵消抗腫瘤免疫并解釋為什么腫瘤在某些動(dòng)物中繼續生長(cháng)。

 

 

圖7|缺乏 T 細胞的動(dòng)物中小膠質(zhì)細胞活化的改變

 

8、促炎癥反應在人類(lèi)小膠質(zhì)細胞中是保守的

       我們研究了人類(lèi)小膠質(zhì)細胞的促炎癥反應及其與 BCBM 患者的相關(guān)性。我們基于先前的工作開(kāi)發(fā)了 BCBM 人源化小鼠模型,其中 MITRG 小鼠(人 CSF1、IL3 和 TPO 敲入 Rag2?/?Il2rγ?/? 小鼠)在移植人誘導多能性后用人小膠質(zhì)細胞和巨噬細胞重建-衍生的造血祖細胞(iHPSC)進(jìn)入出生后大腦。與 BCBM 患者樣本相比,我們能夠使用這些動(dòng)物來(lái)研究人類(lèi)小膠質(zhì)細胞對腫瘤發(fā)生的初始反應。我們給 MITRG 小鼠幼崽注射了 GFP 標記的 iHPSC,使其植入 10 周,并在心內注射了 mCherry 標記的 231BR 細胞(圖 8a)。 3周后收集對照小鼠和轉移小鼠,熒光顯微鏡證實(shí)了 GFP+ 人小膠質(zhì)細胞和 mCherry+ 231BR 轉移瘤的植入。隨后分離并捕獲人類(lèi)細胞進(jìn)行測序(圖8a)。

       聚類(lèi)和標記基因分析揭示了一個(gè)獨特的 231BR 細胞群 (VIM) 和幾個(gè)髓系細胞群(圖 8b)。這些包括人血管周?chē)奘杉毎–D163)、小膠質(zhì)細胞(TMEM119、P2RY12)和增殖性髓系細胞群(MKI67)(圖8b)。我們鑒定出 4,904 個(gè)基因在對照大腦和轉移大腦的小膠質(zhì)細胞之間存在差異表達。 GO分析顯示,與在小鼠中觀(guān)察到的類(lèi)似途徑在人類(lèi)小膠質(zhì)細胞中上調(圖8c)。我們使用基因評分來(lái)研究人類(lèi)小膠質(zhì)細胞的異質(zhì)性和小鼠 BCBM 中上調的核心主題的表達(圖 2d-f)。這表明,人類(lèi)小膠質(zhì)細胞亞群中的 IFN 反應、AP 和分泌程序有明顯但重疊的表達,就像在小鼠中觀(guān)察到的那樣。重要的是,該模型中 IFN 反應和 AP 主題的上調并不像在小鼠小膠質(zhì)細胞中觀(guān)察到的那樣強勁。這與 MITRG 小鼠中更嚴重的免疫缺陷以及我們的發(fā)現一致,即 T 細胞對于小膠質(zhì)細胞激活很重要。

       我們使用人類(lèi) BCBM 腫瘤的批量 RNA-seq 數據集比較了 BCBM 患者小膠質(zhì)細胞特征的預后相關(guān)性。我們發(fā)現,典型小膠質(zhì)細胞標志物高表達的患者的總體生存率顯著(zhù)提高,這表明小膠質(zhì)細胞浸潤增加與更好的預后相關(guān)(圖8d)。我們進(jìn)一步發(fā)現,AP (MHC-II) 和分泌程序 (CSF1) 關(guān)鍵基因特征的較高表達與總生存期增加相關(guān),而 IFN 反應基因 BST2 的較高表達與生存期下降相關(guān)。這些數據表明,小膠質(zhì)細胞促炎癥反應對患者具有臨床益處,并支持以下假設:T 細胞激活小膠質(zhì)細胞(即上調 AP 程序)是抗腫瘤小膠質(zhì)細胞的關(guān)鍵特征,并且不完全激活(即僅 IFN 應答計劃)會(huì )導致更糟糕的結果??傊?,我們的研究支持一個(gè)模型,其中小膠質(zhì)細胞對于支持 CNS 中的抗腫瘤免疫反應和抑制 BCBM 至關(guān)重要(圖 8e)。

 

 

圖8|促炎癥反應在人類(lèi)小膠質(zhì)細胞中是保守的,并且與 BCBM 患者更好的預后相關(guān)。

 

實(shí)驗方法

BCBM、IF 分析、CODEX 成像、scRNA-seq、流式細胞術(shù)分析、iHPCs、MULTI-seq、FTY720 HCl 給藥、細胞因子篩選、聚類(lèi)和差異表達、GO術(shù)語(yǔ)分析和基因評分、LDA topic模型、擬時(shí)序分析、生存分析。

參考文獻

Evans, K.T., Blake, K., Longworth, A. et al. Microglia promote anti-tumour immunity and suppress breast cancer brain metastasis. Nat Cell Biol (2023).